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申请/专利权人：大连普瑞康生物技术有限公司
摘要：本发明涉及本发明涉及雪莲培养物发酵技术领域，具体说是一种含圣草酚7‑O‑葡糖苷的雪莲培养物水的制备方法。通过亚临界丙烷萃取去除非极性脂溶成分；双水相萃取分离多糖；脱醇后的雪莲培养物即可通过代谢工程技术使其圣草酚转化为圣草酚7‑O‑葡糖苷。本发明通过构建异源表达圣草酚7‑O‑葡萄糖苷酿酒酵母工程菌，以发酵的方式促进雪莲培养物中圣草酚糖基化，转化为生物利用度更高的圣草酚7‑O‑葡萄糖苷。提高圣草酚糖基化转化率的同时不影响雪莲培养物其他活性成分，同时本发明的前处理方式可有效分离不可溶成分。
主权项：1.一种含圣草酚7-O-葡糖苷的雪莲培养物水的制备方法，其特征在于：包括以下步骤S1提纯：以雪莲培养物为原料，通过亚临界流体萃取去除非极性脂溶成分，通过双水相萃取分离多糖；S2：制备工程菌感受态细胞；S3重组表达载体的构建：将黄烷酮7-O-葡萄糖基转移酶核苷酸序列按照工程菌对编码氨基酸密码子偏爱性进行优化，以密码子适应指数表示，以优化后的cDNA为模板，通过PCR扩增得到拟UF7GT基因的pUC57载体，构建pET-28a+-AtGT质粒，转化得到工程菌；S4发酵：将工程菌1％-5％接种到含有萃取后的雪莲培养物溶液中，雪莲培养物溶液浓度为25g100ml,添加0.1-0.5mM的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷的诱导剂，控制诱导温度16-22℃、诱导发酵时间12-48h即可。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 大连普瑞康生物技术有限公司 一种含圣草酚7-O-葡糖苷的雪莲培养物水的制备方法
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