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申请/专利权人:昆山亚香香料股份有限公司
摘要:本发明提供了一种利用重组大肠杆菌合成γ‑内酯的方法及其应用,所述重组大肠杆菌由重组质粒导入宿主大肠杆菌中得到,所述重组质粒是由密码子优化后的细胞色素P450基因CYP和或磷酸脱氢酶基因GDH的编码基因与表达载体pDuet连接构建而成;本发明以脂肪酸为底物的产γ‑内酯,通过质粒游离表达磷酸脱氢酶和细胞色素P450来完成脂肪酸到内酯的催化,从而提高γ‑内酯的催化效率以及产量。
主权项:1.一种合成γ-内酯的重组大肠杆菌,其特征在于:所述重组大肠杆菌由重组质粒导入宿主大肠杆菌中得到,所述重组大肠杆菌在基因组内酯水解酶基因ysgA处整合表达NADH氧化酶基因NOX、磷酸脱氢酶基因GDH和血红蛋白基因HB,并通过重组质粒表达细胞色素P450CYP;所述CYP为来源于毛霉MaCYP、少根根霉RaCYP、拉曼被孢霉UrCYP、JfCYP中的一种或多种;所述毛霉MaCYP的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示,所述少根根霉RaCYP的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示,所述拉曼被孢霉UrCYP的氨基酸序列如SEQIDNO.3所示,所述JfCYP的氨基酸序列如SEQIDNO.4所示;所述GDH为来源于大肠杆菌EcGDH、;所述枯草芽孢杆菌BsGDH的氨基酸序列如SEQIDNO.5所示,所述大肠杆菌EcGDH的氨基酸序列如SEQIDNO.6所示,所述奇异变形杆菌PmGDH的氨基酸序列如SEQIDNO.7所示。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 昆山亚香香料股份有限公司 一种利用重组大肠杆菌合成γ-内酯的方法
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