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申请/专利权人:四川农业大学
摘要:本发明提供了一种RAA‑LFD检测停乳链球菌的引物对和探针组合及其应用,属于致病菌检测技术领域。本发明检测停乳链球菌的引物对和探针中,上游引物序列如SEQIDNO:1~3所示,下游引物序列如SEQIDNO:4~5所示,探针序列如SEQIDNO:6所示;利用本发明引物对和探针的组合,可实现对停乳链球菌的准确检测,且上述引物对和探针组合对停乳链球菌的最低检测限为1.002×102pgμL,并且具有检测时间短、反应温度易达到、特异性强、灵敏度高和检测结果符合率高等优点,对设备及人员操作技术要求低,便于在缺乏实验室检测设备的场景下开展停乳链球菌的检测。
主权项:1.一种RAA-LFD检测停乳链球菌的引物对和探针组合,其特征在于,所述引物对为:ISP-F1ISP-R1、ISP-F1ISP-R2、ISP-F2ISP-R1、ISP-F2ISP-R2、ISP-F3ISP-R1或ISP-F3ISP-R2;其中,ISP-F1、ISP-F2、ISP-F3、ISP-R1和ISP-R2的核苷酸序列如下:ISP-F1:5’-AATTTAAATCAGAGGCAAAAGGTGACCACGGAA-3’;ISP-F2:5’-AATGCTCCACATAGGCCGCATAAGTATTAACAGA-3’;ISP-F3:5’-TCCCAAAGAACTTTCTGACATGGCAATAGCAAC-3’;ISP-R1:5’-ATCTGATGTTCTTAATCCTGCAGAGCCTACTCG-3’;ISP-R2:5’-GATGTTCTTAATCCTGCAGAGCCTACTCGTCCA-3’;所述下游引物的5’端标记有生物素;所述探针的5’端标记有荧光素,3’端标记C3Spacer,在探针31bp处为dSpacer;所述探针为:5’-FAM-TATCTCCAAATTTAAATCAGAGGCAAAAGGdSpacerGACCACGGAAGAGGTGTC3Spacer-3’。
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百度查询: 四川农业大学 一种RAA-LFD检测停乳链球菌的引物对和探针组合及其应用
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