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申请/专利权人:海南大学
摘要:本发明提供了一种利用RTX逆转录酶和BstDNA聚合酶的RT‑LAMP可视化检测石斑鱼神经坏死病毒的体系,包括一下步骤:1提取石斑鱼神经坏死病毒RNA;2设计并合成特异性引物;3对钙黄绿素和MnCl2浓度比进行优化;4对反应体系特异性和灵敏度进行分析。本发明利用RTX逆转录酶和BstDNA聚合酶直接进行RNA病毒检测,并利用钙黄绿素显示指示剂使检测结果可视化,可肉眼观察检测结果,具有操作简单、快速、准确、高灵敏度等特点,对于资源匮乏地区疫情监控具有很大潜力。
主权项:1.一种海水鱼神经坏死病毒可视化RT-LAMP检测体系,其特征在于,以下步骤:1)对感染神经坏死病毒的石斑鱼组织提取RNA;2)设计并合成RT-LAMP引物;3)所述RT-LAMP引物包括外引物F3、B3,内引物FIP、BIP,环状引物LF、LB。引物组核苷酸序列如下所示:F3:AGTCGTTGCCAAATGGTGG;B3:GCGGTAGTCTCTTCAGGTGT;FIP:GACGCTGCTCCTTTCCCACGAACAGTCCGACCCCAGT;BIP:GGAGTGTTCGATTGAGCGTTTGCCGACACACAGGAGT;LF:CAGAGGAGCGTGCGGGTG;LB:GATGTGGTCAACGTGTCAG;4)检测可行性验证;5)优化钙黄绿素和MnCl2浓度比;6)检测特异性验证;7)检测灵敏度验证。
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权利要求:
百度查询: 海南大学 一种海水鱼神经坏死病毒可视化RT-LAMP检测体系
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