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申请/专利权人：广西壮族自治区林业科学研究院
摘要：本发明涉及食用菌保质技术领域，特别涉及一种农杆菌介导的马尾松胚性愈伤高效转化的方法，本发明根据马尾松的培养条件进行优化，首先对马尾松材料进行预处理，通过继代和预处理培养基的处理得出了马尾松材料的最佳预处理条件，之后对材料侵染条件和培养基、共培养条件和培养基、筛选培养条件和培养基均进行优化处理，得出了针对马尾松胚性愈伤组织进行农杆菌转化培养的最佳培养条件，使得马尾松胚性愈伤的存活率达到87.5％以上，最高达到90％，大大提高了马尾松的存活率。
主权项：1.一种农杆菌介导的马尾松胚性愈伤高效转化的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：1材料预处理：将常规培养条件下的继代5-15次的胚性愈伤，转至预处理培养基中；2材料侵染：在15～30℃环境条件下，将预处理培养后的材料转至农杆菌液中浸泡30分钟；3共培养：步骤2侵染后的材料转至共培养的培养基中培养；4筛选培养：将步骤3共培养之后的材料放入筛选培养基中培养即完成马尾松的胚性愈伤转化；所述步骤1中的预处理培养基由如下成分组成：DCR培养基、30gL蔗糖、3.5gL植物凝胶、0.5～1gL2,4-D、0.5gL6-BA、2.5gLABA、0.4～0.8gLGAs、0.5gL酸水解酪蛋白和0.45gL谷胺酰胺；所述步骤2中的农杆菌液由如下成分组成：DCR培养基、30gL蔗糖、2gL2,4-D、1gL6-BA、0.5gL酸水解酪蛋白、0.45gL谷胺酰胺、OD600值0.4～0.8农杆菌；所述步骤3中的共培养的培养基由如下成分组成：DCR培养基、30gL蔗糖、3.5gL植物凝胶、2gL2,4-D、1gL6-BA、0.5gL酸水解酪蛋白、0.45gL谷胺酰胺、5～10mgL乙酰丁香酮；所述步骤4中的筛选培养基由如下成分组成：DCR培养基、30gL蔗糖、3.5gL植物凝胶、2gL2,4-D、1gL6-BA、100～200mgL特美汀、300mgL羧苄青霉素、25～35gL潮霉素、5～15mgLBasta。
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百度查询： 广西壮族自治区林业科学研究院 一种农杆菌介导的马尾松胚性愈伤高效转化的方法
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