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一种体外诱导IPS细胞分化生成人真皮成纤维细胞的方法及应用 

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申请/专利权人:广东金专生物科技有限公司

摘要:本发明属于细胞工程技术领域,具体涉及一种体外诱导IPS细胞分化生成人真皮成纤维细胞的方法及应用。所述的方法为想培养基中添加特定的细胞分化剂A‑D和消化酶。其中,所述的细胞分化剂A包括Ⅱ型胶原酶、胎牛血清、青霉素和链霉素;所述的消化酶为包括胰酶、和乙二胺四乙酸的D‑Hank消化液。本发明提供的方法可显著提高成纤维细胞的活率,以实现成纤维细胞的大量制备,并且维持成纤维细胞的典型特征。

主权项:1.一种体外诱导IPS细胞分化生成真皮成纤维细胞的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、将IPS细胞加入培养基Ⅰ中培养,再转移至培养基Ⅱ中培养,弃去未贴壁细胞,获得细胞a;S2、将步骤S1中的细胞a加入含有细胞分化剂A的培养基Ⅲ中培养,获得分化细胞b;S3、将步骤S2中的分化细胞b加入含有细胞分化剂B的培养基Ⅳ中培养,获得分化细胞c;S4、将步骤S3中的分化细胞c加入培养基Ⅴ,加入消化酶,消化培养后,加入细胞分化剂C,获得分化细胞d;S5、将步骤S4中的分化细胞d加入培养基Ⅵ,加入细胞分化剂D,传代培养,获得成纤维细胞;所述的细胞分化剂A包括Ⅱ型胶原酶;所述的消化酶包括乙二胺四乙酸。

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