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申请/专利权人：上海碧云天生物技术股份有限公司
摘要：本发明提供了一系列底物结合口袋经改造的高酶活性、高热稳定性的萤火虫萤光素酶，及其制备方法及应用。本发明人通过对萤火虫萤光素酶底物结合口袋空间结构的分析，考虑了萤火虫萤光素酶涉及酶活性与热稳定性的大量氨基酸位点，设计、构建并检测了一系列萤火虫萤光素酶突变体，所述萤火虫萤光素酶具有高的酶活性以及热稳定性。
主权项：1.一种萤火虫萤光素酶突变体，其特征在于，其空间结构上邻近底物结合口袋，对底物的识别与结合或蛋白空间构象的稳定具有贡献，其氨基酸序列对应于SEQIDNO:2所示氨基酸序列，包含选自a-t的突变或其组合：a第293位氨基酸F突变为L；b第254位氨基酸Y突变为S；c第239位由V突变为A；d第137位由N突变为K，第235位由A突变为T，第280位由K突变为R，第333位由N突变为D，第422位由I突变为V；e第57位由K突变为R；f第42位由T突变为A，第282位由E突变为D，第392位由K突变为I，第426位由D突变为V；g第525位由S突变为P；h第231位氨基酸N突变为A，R或K；i第229位氨基酸A突变为R或K；j第229位由A突变为K，第231位由N突变为K；k第231位由N突变为K，第293位由F突变为L；l第229位由A突变为R，第231位由N突变为R；m第231位由N突变为R，第293位由F突变为L；n第229位由A突变为K，第231位由N突变为A；o第231位由N突变为A，第293位由F突变为L；p第229位由A突变为K，第231位由N突变为K，第293位由F突变为L；q第229位由A突变为R，第231位由N突变为K，第293位由F突变为L；r第229位由A突变为K，第231位由N突变为R，第293位由F突变为L；s第229位由A突变为R，第231位由N突变为R，第293位由F突变为L；t第229位由A突变为K，第231位由N突变为K，第293位由F突变为L。
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百度查询： 上海碧云天生物技术股份有限公司 经改造的萤火虫萤光素酶、其制备方法及应用
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