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用于产生唾液酸化寡糖的唾液酸转移酶 

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申请/专利权人:因比奥斯公司

摘要:本发明在合成生物学、代谢工程和细胞培养的技术领域中。本发明涉及新鉴定的α‑2,6‑唾液酸转移酶,其对于乳‑N‑新四糖(Gal‑β1,4‑GlcNAc‑β1,3‑Gal‑β1,4‑Glc)的末端半乳糖残基具有α‑2,6‑唾液酸转移酶活性。本发明还描述了用于通过使用所述新鉴定的α‑2,6‑唾液酸转移酶中的任一种来产生唾液酸化寡糖的方法,以及用于纯化所述唾液酸化寡糖的方法。本发明还提供了用于产生所述唾液酸化寡糖的细胞,和所述细胞在培养或温育中的用途。

主权项:1.用于产生6’唾液酸化寡糖,优选地LSTc(Neu5Ac-α2,6-Gal-β1,4-GlcNAc-β1,3-Gal-β1,4-Glc)的方法,所述方法包括:使α-2,6-唾液酸转移酶与包含含有唾液酸残基的供体和从包括寡糖或二糖的列表中选择的接纳体的混合物相接触,所述接触在所述α-2,6-唾液酸转移酶催化唾液酸残基从所述供体向所述接纳体的转移的条件下进行,由此产生所述6’唾液酸化寡糖,其特征在于,所述α-2,6-唾液酸转移酶选自由下列各项组成的列表:iα-2,6-唾液酸转移酶,其对于乳-N-新四糖(LNnT,Gal-β1,4-GlcNAc-β1,3-Gal-β1,4-Glc)的末端半乳糖(Gal)残基具有α-2,6-唾液酸转移酶活性,并且包含在至少100个氨基酸残基,优选地至少150个氨基酸残基,更优选地至少200个氨基酸残基的链段上与由SEQIDNO:1所示的氨基酸序列至少60.0%同一的氨基酸序列;iiα-2,6-唾液酸转移酶,其对于乳-N-新四糖(LNnT,Gal-β1,4-GlcNAc-β1,3-Gal-β1,4-Glc)的末端半乳糖(Gal)残基具有α-2,6-唾液酸转移酶活性,并且包含在至少100、至少110、至少120、至少130、至少140、至少150、至少160、至少170、至少180、至少190、至少200、至少210、至少220、至少230、至少240、至少250、至少260、至少270、至少280、至少290或至少300个氨基酸残基的链段上与由SEQIDNO:1所示的氨基酸序列至少60.0%、至少65.0%、至少70.0%、至少75.0%、至少80.0%、至少85.0%、至少90.0%、至少95.0%、至少96.0%、至少97.0%、至少98.0%、至少98.5%或至少99.0%同一的氨基酸序列;iiiα-2,6-唾液酸转移酶,其对于乳-N-新四糖(LNnT,Gal-β1,4-GlcNAc-β1,3-Gal-β1,4-Glc)的末端半乳糖(Gal)残基具有α-2,6-唾液酸转移酶活性,并且包含与由SEQIDNO:1所示的全长氨基酸序列至少60.0%、至少65.0%、至少70.0%、至少75.0%、至少80.0%、至少85.0%、至少90.0%、至少95.0%、至少96.0%、至少97.0%、至少98.0%、至少98.5%或至少99.0%同一的氨基酸序列;ivα-2,6-唾液酸转移酶,其对于乳-N-新四糖(LNnT,Gal-β1,4-GlcNAc-β1,3-Gal-β1,4-Glc)的末端半乳糖(Gal)残基具有α-2,6-唾液酸转移酶活性,并且其中所述α-2,6-唾液酸转移酶包含由SEQIDNO:1所示的氨基酸序列。

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权利要求:

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