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申请/专利权人：天津商业大学

摘要：本发明公开了一种CDs@Ti3C2基适体传感器检测KAN的方法。本发明是首先合成CDs@Ti3C2，然后将其修饰在玻碳电极表面，再逐层修饰互补DNA、牛血清白蛋白、适体和亚甲基蓝，来构建检测KAN的敏感界面，该敏感界面能实现牛乳中KAN残留的超灵敏检测。将CDs@Ti3C2用作GCE的电极改性剂，再逐层修饰cDNA、BSA、aptamer和信号分子MB，所构建的电化学适体传感器在KAN浓度范围为1fM～1mM具有较高的灵敏度和较宽的线性范围，检测限低至0.892fM。该电化学适体传感器制备过程简单，且具有灵敏度高、重现性好、选择性高、稳定性好等特点，能超灵敏检测牛乳中痕量KAN残留。

主权项：1.一种CDs@Ti3C2基适体传感器检测KAN的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1：Ti3C2的制备1称取Ti3AlC2粉末2.0g于聚四氟乙烯容器中，再缓慢加入质量百分比40％HF溶液，20mL，在40℃下连续搅拌12h；2将上述溶液以5000rpm离心5min，水洗沉淀物，直至PH达到6；3室温干燥清洗后的沉淀物，得到Ti3C2多层膜；4称取0.05g干粉加入25mL二甲基亚砜DMSO，搅拌12h；5将上述溶液以5000rpm离心5min，上清液即为Ti3C2分散液；步骤2：CDs的制备1在5ml超纯水中加入0.5g柠檬酸和0.5g尿素，搅拌至完全溶解；2将上述溶液放入微波炉中加热3min，冷却至室温后取出反应产物；3在烧杯中加入20mL蒸馏水溶解上述反应产物，搅拌至完全溶解；4通过孔径为0.45μm的注射器过滤器获得CDs母液；步骤3：CDs@Ti3C2的制备1首先，将步骤2中制备的CDs母液加入到步骤1中制备的Ti3C2溶液中，CDs母液与Ti3C2溶液的体积比为1:5，磁力连续搅拌10min；2将上述溶液继续超声处理10min，最终得到的混合溶液为CDs@Ti3C2分散液；步骤4：CDs@Ti3C2基电化学适体传感器敏感界面的构建1选用GCE作为工作电极，用0.3μm和50nm的氧化铝粉依次抛光GCE，直至电极表面呈镜面状，然后分别用乙醇和蒸馏水彻底清洗；2在干净的GCE表面滴加10μLCDs@Ti3C2，室温干燥之后，用去离子水清洗，再次室温干燥之后，获得CDs@Ti3C2GCE；3在CDs@Ti3C2GCE上孵育0.25μM的cDNA160min后，用去离子水清洗表面并在室温条件下干燥，得到cDNACDs@Ti3C2GCE；4在cDNACDs@Ti3C2GCE上孵育1％BSA1h，用去离子水清洗表面并在室温条件下干燥，得到BSAcDNACDs@Ti3C2GCE；5在BSAcDNACDs@Ti3C2GCE上孵育0.2μMaptamer120min，用去离子水清洗表面并在室温条件下干燥，得到aptamerBSAcDNACDs@Ti3C2GCE；6在aptamerBSAcDNACDs@Ti3C2GCE上孵育3.5μMMB，在37℃孵育1h，用去离子水清洗表面并在室温条件下干燥，得到MBaptamerBSAcDNACDs@Ti3C2GCE；步骤5：KAN的工作曲线绘制1在MBaptamerBSAcDNACDs@Ti3C2GCE表面滴加KAN各浓度的标准液，并依次用去离子水清洗，室温干燥；将该工作电极置于铁氰化钾溶液中进行差分脉冲伏安测试，根据电流值与KAN浓度的关系，绘制工作曲线；步骤6：待测样品牛乳中KAN的检测1将CDs@Ti3C2基电化学适体传感器用于KAN的检测，在与步骤5相同的条件下，记录电流值；2根据步骤5所得到的KAN的工作曲线，计算待测样品中KAN的浓度。

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