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一种血清心梗标志物的SERS双蛋白现场即时检测方法 

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申请/专利权人:厦门大学

摘要:本发明公开了一种血清心梗标志物的SERS双蛋白现场即时检测方法,包括以下步骤:功能化SERS标签粒子的制备、功能化磁珠的制备、聚合物修饰耦合基底的制备以及目标蛋白的信号传感。本发明基于表面增强拉曼效应,设计高灵敏的多元纳米材料标签混合方式,结合易于分离的磁性微粒及“一步法孵育”的方式构建“三明治”夹层结构,实现对两种心梗标志物蛋白的同时快速传感。本发明用于检测生物标志物蛋白的体系由抗体修饰的金纳米探针、抗体修饰的磁珠构成,配合聚合物修饰的金片,利用磁珠在金片上干燥形成均匀膜的方式,提高拉曼信号的强度以及信号的可重复性。

主权项:1.一种血清心梗标志物的SERS双蛋白现场即时检测方法,其特征在于,包括以下步骤:1功能化SERS标签粒子的制备:将拉曼标记分子修饰到金纳米粒子表面,同时以DSP分子作为桥联修饰两种抗体蛋白,形成功能化SERS标签粒子Au@RM@Antibody;2功能化磁珠的制备:利用EDCNHS法活化磁珠表面的羧基分子,再连接两种抗体蛋白,形成MB@Antibody粒子;3聚合物修饰耦合基底的制备:将聚烯丙基盐酸盐通过自组装的方式修饰到金片表面,形成正电功能化的耦合基底;具体包括首先在单晶硅面上,利用磁控溅射层积上一层3-7nmCr,及一层90-100nmAu;金片利用砂轮切割裁切成2.5mm*2.5mm大小,金片用浓硫酸-双氧水洗液浸泡洗涤,去除表面可能存在的分子吸附杂质;将洗涤后的金片浸泡在聚烯丙基胺盐酸盐溶液中,使金表面修饰上PAHs,5分钟后取出,在1MNaCl溶液中浸泡1-3分钟,以稳定吸附层;最后用水冲洗多余的盐溶液,氮气吹干表面,即可得到正电修饰的金片;4目标蛋白的信号传感:将功能化SERS标签粒子、功能化磁珠和目标蛋白样品混合孵育,再通过吸吐-磁吸的方式洗涤后用纯水定容混匀得到磁性复合物混合液,滴加少量磁性复合物混合液到步骤3制得的聚合物修饰耦合基底上,加热烘干后用手持式拉曼光谱仪采集信号。

全文数据:

权利要求:

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