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申请/专利权人：天野酶制品株式会社

摘要：本发明的目的在于提供抑制了高温下的反应性降低的蛋白质谷氨酰胺酶。就序列号1所示的氨基酸序列而言，包含含有在特定位置的氨基酸残基或氨基酸序列中导入有替换为规定的氨基酸残基或氨基酸序列的氨基酸序列的多肽的蛋白质谷氨酰胺酶与包含序列号1所示的氨基酸序列的多肽相比，抑制了高温下的反应性的降低。

主权项：1.一种修饰型蛋白质谷氨酰胺酶，其特征在于，包含以下的I～III中任一项所示的多肽：I多肽，其包含在序列号1所示的氨基酸序列中导入有下述A～AY中的至少任一种替换的氨基酸序列，A第38位的氨基酸残基替换为丙氨酸残基、苯丙氨酸残基、异亮氨酸残基、亮氨酸残基、蛋氨酸残基、精氨酸残基、缬氨酸残基、酪氨酸残基、半胱氨酸残基、赖氨酸残基、丝氨酸残基或苏氨酸残基；B第156位的氨基酸残基替换为酪氨酸残基；C第72位～第75位的连续的四个氨基酸残基替换为包含RYGVKMSNQDG的氨基酸序列序列号2；D第64位的氨基酸残基替换为谷氨酸残基；E第82位的氨基酸残基替换为脯氨酸残基、色氨酸残基或苯丙氨酸残基；F第116位的氨基酸残基替换为异亮氨酸残基、缬氨酸残基、半胱氨酸残基、亮氨酸残基或丝氨酸残基；G第140位的氨基酸残基替换为异亮氨酸残基、谷氨酸残基、酪氨酸残基、天冬氨酸残基或缬氨酸残基；H第2位的氨基酸残基替换为精氨酸残基或色氨酸残基；I第3位的氨基酸残基替换为精氨酸残基；J第16位的氨基酸残基替换为丙氨酸残基、半胱氨酸残基、苯丙氨酸残基、亮氨酸残基、蛋氨酸残基、精氨酸残基、丝氨酸残基、缬氨酸残基或色氨酸残基；K第86位的氨基酸残基替换为脯氨酸残基；L第5位的氨基酸残基替换为亮氨酸残基、苏氨酸残基或缬氨酸残基；M第9位的氨基酸残基替换为谷氨酸残基、天冬氨酸残基、蛋氨酸残基、半胱氨酸残基、苯丙氨酸残基、甘氨酸残基、脯氨酸残基、精氨酸残基或色氨酸残基；N第11位的氨基酸残基替换为半胱氨酸残基、甘氨酸残基、组氨酸残基、蛋氨酸残基、精氨酸残基或缬氨酸残基；O第13位的氨基酸残基替换为蛋氨酸残基、天冬酰胺残基、苯丙氨酸残基或色氨酸残基；P第17位的氨基酸残基替换为甘氨酸残基或丙氨酸残基；Q第19位的氨基酸残基替换为亮氨酸残基、蛋氨酸残基、精氨酸残基、丝氨酸残基或苏氨酸残基；R第20位的氨基酸残基替换为甘氨酸残基、谷氨酸残基或丝氨酸残基；S第22位的氨基酸残基替换为甘氨酸残基；T第26位的氨基酸残基替换为缬氨酸残基；U第30位的氨基酸残基替换为半胱氨酸残基、苯丙氨酸残基、组氨酸残基、精氨酸残基、缬氨酸残基、酪氨酸残基或谷氨酰胺残基；V第50位的氨基酸残基替换为色氨酸残基；W第51位的氨基酸残基替换为脯氨酸残基、组氨酸残基、色氨酸残基或苯丙氨酸残基；X第52位的氨基酸残基替换为缬氨酸残基；Y第53位的氨基酸残基替换为谷氨酰胺残基；Z第54位的氨基酸残基替换为天冬酰胺残基；AA第57位的氨基酸残基替换为半胱氨酸残基；AB第58位的氨基酸残基替换为苏氨酸残基；AD第73位的氨基酸残基替换为缬氨酸残基；AE第73～75位的连续的三个氨基酸残基替换为包含PMG的氨基酸序列；AF第79位的氨基酸残基替换为赖氨酸残基或精氨酸残基；AH第92位的氨基酸残基替换为甘氨酸残基、丝氨酸残基或缬氨酸残基；AI第94位的氨基酸残基替换为色氨酸残基或酪氨酸残基；AJ第95位的氨基酸残基替换为天冬氨酸残基、苯丙氨酸残基、半胱氨酸残基或蛋氨酸残基；AK第96位的氨基酸残基替换为丙氨酸残基、苯丙氨酸残基、甘氨酸残基、异亮氨酸残基、赖氨酸残基、亮氨酸残基、天冬酰胺残基、谷氨酰胺残基、精氨酸残基、丝氨酸残基、苏氨酸残基、色氨酸残基、酪氨酸残基、天冬氨酸残基、半胱氨酸残基或蛋氨酸残基；AL第97位的氨基酸残基替换为赖氨酸残基；AM第160位的氨基酸残基替换为天冬氨酸残基或苯丙氨酸残基；AN第164位的氨基酸残基替换为丙氨酸残基、半胱氨酸残基、天冬氨酸残基、苯丙氨酸残基、组氨酸残基、亮氨酸残基、蛋氨酸残基、精氨酸残基或丝氨酸残基；AO第12位的氨基酸残基替换为半胱氨酸残基、蛋氨酸残基、色氨酸残基或酪氨酸残基；AP第24位的氨基酸残基替换为丝氨酸残基；AQ第98位的氨基酸残基替换为苯丙氨酸残基；AR第131位的氨基酸残基替换为亮氨酸残基；AS第134位的氨基酸残基替换为色氨酸残基；AT第135位的氨基酸残基替换为异亮氨酸残基、半胱氨酸残基、苯丙氨酸残基或缬氨酸残基；AU第136位的氨基酸残基替换为异亮氨酸残基、精氨酸残基、亮氨酸残基或缬氨酸残基，AV第168位的氨基酸残基替换为精氨酸残基、天冬酰胺残基或半胱氨酸残基；AW第175位的氨基酸残基替换为苏氨酸残基、丙氨酸残基、缬氨酸残基或半胱氨酸残基；AX第182位的氨基酸残基替换为亮氨酸残基、蛋氨酸残基、谷氨酸残基、谷氨酰胺残基、甘氨酸残基、天冬氨酸残基或丙氨酸残基；以及AY第184位的氨基酸残基替换为色氨酸残基或苯丙氨酸残基；II多肽，其是在导入有所述A～AY中的至少任一者所示的替换的氨基酸序列中，除所述被替换的氨基酸残基以外的1个或多个氨基酸残基被替换、添加、插入或缺失而成的，且65℃下的蛋白质谷氨酰胺酶相对于60℃下的蛋白质谷氨酰胺酶活性的相对活性与包含序列号1所示的氨基酸序列的多肽的所述相对活性相比提高，以及III多肽，其在导入有所述A～AY中的至少任一者所示的替换的氨基酸序列中，除所述被替换的氨基酸残基以外的部分的序列一致性为70％以上，且65℃下的蛋白质谷氨酰胺酶相对于60℃下的蛋白质谷氨酰胺酶活性的相对活性与包含序列号1所示的氨基酸序列的多肽的所述相对活性相比提高。

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