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申请/专利权人：华夏源(上海)生命科技有限公司
摘要：本发明公开了一种ESO多因的制备方法，从低温储存容器中取出脐带间充质干细胞，让脐带间充质干细胞迅速解冻；将解冻后的脐带间充质干细胞转移至细胞培养皿中培养；接种针将培养皿内的细胞菌落均匀划分成六块，再将接种针置于酒精灯外焰灼烧，迅速将接种针插入一块细胞菌落，并迅速取出，每块菌落同上操作三次，直至划分的每块菌落预灼伤完毕；再执行第二次灼烧感染培养；并使用Reference超纯水系统将水中的导电介质去除；依次以300G，2000G，10000G的转速离心处理，最终离心分离器皿的上清液即为ESO多因，本发明涉及ESO多因提取技术领域。该ESO多因的制备方法，达到了减少ESO多因的制备工序，提高ESO多因的制备纯度的目的。
主权项：1.一种ESO多因的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、从低温储存容器中取出脐带间充质干细胞，并迅速将其置于36.5℃的水槽中晃动，让脐带间充质干细胞迅速解冻；步骤二、取无菌的10ml培养皿，并在培养皿中配置专属拥有FDA的MDF号无血清培养基，并将解冻后的脐带间充质干细胞转移至细胞培养皿中培养3天，并保持培养皿温度在36.5℃；步骤三、通过接种针将培养皿内的细胞菌落均匀划分成六块，再将接种针置于酒精灯外焰灼烧，直至接种针的针头灼烧10-15s，迅速将接种针插入一块细胞菌落，并迅速取出，每块菌落同上操作三次，直至划分的每块菌落预灼伤完毕；步骤四、将灼伤完成后的脐带间充质干细胞培养皿，保持温度在36.5℃继续培养30h，执行第二次灼烧感染培养；步骤五、将第二次培养后的脐带间充质干细胞转移至离心分离器皿中，并使用Reference超纯水系统将水中的导电介质去除；步骤六、离心分离器皿中处理后的脐带间充质干细胞及其培养液加入离心机中，依次以300G，2000G，10000G的转速离心处理，最终离心分离器皿的上清液即为ESO多因；步骤七、检测离心得到ESO多因中杂质的含量；所述步骤一中带间充质干细胞迅速解冻的时间为0.9min-1.2min；所述脐带间充质干细胞采用miR-525-3p高表达的脐带间充质干细胞。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 华夏源(上海)生命科技有限公司 一种ESO多因的制备方法
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