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一种基于TtAgo的幽门螺杆菌等温扩增一管式检测用组合物、试剂盒和检测方法 

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申请/专利权人:山东莱博生物科技有限公司

摘要:本发明涉及一种基于TtAgo的幽门螺杆菌等温扩增一管式检测用组合物、试剂盒和检测方法。包括CagA引物组、VacA引物组、UreA引物组;CagA引导gDNA组、VacA引导gDNA组、UreA引导gDNA组;CagA荧光探针、VacA荧光探针、UreA荧光探针。本发明还提供了利用该试剂盒一管式检测幽门螺杆菌鉴定基因和毒力基因的方法。本发明首次采用LAMP和TtAgo组合一管式检测方法可以同时LAMP扩增‑Ago酶切幽门螺杆菌的毒力基因和鉴定基因,从而获得待测样本是否感染或感染CagA和或VacA的检测结果,可实现单管多重靶基因定性检测,实现对幽门螺杆菌的核酸分型。

主权项:1.一种基于TtAgo的幽门螺杆菌等温扩增一管式检测用组合物,其特征在于,包括CagA引物组、VacA引物组、UreA引物组;CagA引导gDNA组、VacA引导gDNA组、UreA引导gDNA组;CagA荧光探针、VacA荧光探针、UreA荧光探针;所述CagA引物组包括外引物对CaA-F3和CaA-B3、内引物对CaA-FIP和CaA-BIP和环引物对CaA-LF和CaA-LB;所述外引物对CaA-F3和CaA-B3、内引物对CaA-FIP和CaA-BIP、环引物对CaA-LF和CaA-LB的核苷酸序列如SEQIDNO.1~6所示;所述VacA引物组包括外引物对VacA-F3和VacA-B3、内引物对VacA-FIP和VacA-BIP和环引物对VacA-LF和VacA-LB;所述外引物对VacA-F3和VacA-B3、内引物对VacA-FIP和VacA-BIP、环引物对VacA-LF和VacA-LB的核苷酸序列如SEQIDNO.7~12所示;所述UreA引物组包括外引物对UreA-F3和UreA-B3、内引物对UreA-FIP和UreA-BIP和环引物对UreA-LF和UreA-LB;所述外引物对UreA-F3和UreA-B3、内引物对UreA-FIP和UreA-BIP、环引物对UreA-LF和UreA-LB的核苷酸序列如SEQIDNO.13~18所示;所述CagA引导gDNA组包括gDNA1CagA和gDNA2CagA,其核苷酸序列如SEQIDNO.19~20所示;所述VacA引导gDNA组包括gDNA1VacA和gDNA2VacA,其核苷酸序列如SEQIDNO.22~23所示;所述UreA引导gDNA组包括gDNA1UreA和gDNA2UreA,其核苷酸序列如SEQIDNO.25~26所示;所述CagA荧光探针的核苷酸序列如SEQIDNO.21所示;所述VacA荧光探针的核苷酸序列如SEQIDNO.24所示;所述UreA荧光探针的核苷酸序列如SEQIDNO.27所示。

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