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基于PfAgo的多重核酸扩增熔解检测方法及试剂盒 

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申请/专利权人:陕西科技大学

摘要:本发明属于基于多重核酸分析的生物学检测技术领域,公开一种基于PfAgo的多重核酸扩增熔解检测方法及试剂盒,该方法通过将PfAgo蛋白的可编程性、单碱基专一性和多周转裂解活性与PCR和RPA扩增相结合,利用PfAgo特异性酶切前后DNA片段长度和GC比例发生改变,从而导致的Tm值发生改变,进行熔解检测实验,并用荧光染料或荧光标记来表征熔解峰,实现多重核酸的检测。该方法克服了多重检测时荧光基团的多重检测数量受限、非特异性扩增及熔解温度相近的扩增产物难区分的问题,实现了多重、特异性、灵敏检测,为多重核酸检测提供一种简单、通用、经济高效的解决方案,具有广泛应用潜力。

主权项:1.一种基于PfAgo的多重核酸扩增熔解检测方法,其特征在于:利用PfAgo蛋白对PCRRPA扩增产物进行切割,切割得到的DNA片段长度和GC比例发生改变,从而导致Tm值发生改变,通过进行熔解检测实验,并用荧光染料或荧光标记来表征熔解峰,实现多重核酸的检测。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 陕西科技大学 基于PfAgo的多重核酸扩增熔解检测方法及试剂盒

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