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一种猴头菌沪猴1210号菌株MNP标记的多重PCR扩增及其基因型鉴定方法 

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申请/专利权人:上海市农业科学院

摘要:本发明公开了一种猴头菌沪猴1210号菌株MNP标记的多重PCR扩增及其基因型鉴定方法,属于猴头菌菌种检测技术领域,通过设置9对MNP标记引物的混合引物对和猴头菌菌种DNA进行多重PCR扩增及基因型鉴定,可以通过9对MNP标记引物对与菌丝基因组DNA进行多重PCR扩增,确定MNP基因型,之后通过比对9对MNP标记基因型,快速的辨别每一组菌菇中的“沪猴1210号”菌株,与常规形态学检测、拮抗试验、出菇试验相比,具有准确性高、特异性强、可重复性好的优点,通过该方法中的多种工序能够针对猴头菌中的“沪猴1210号”菌株进行精确的筛选。

主权项:1.一种猴头菌沪猴1210号菌株MNP标记的多重PCR扩增及其基因型鉴定方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:步骤一、菌丝培养:将猴头菌菌丝转接到PDA平板上,25℃下避光培养,15d后收集菌丝;步骤二、基因组DNA的提取:用CTAB法提取上述菌丝的基因组DNA,紫外分光光度法检测总基因组DNA浓度和纯度,调整样品DNA的浓度为100~200nguL:步骤三、多重PCR扩增:将MNP标记引物组内的9对引物等量混合后对上述提取的DNA进行多重PCR扩增;步骤四、测序:将上述多重PCR的产物加上Illumina的测序接头和barcode并使用Illumina测序仪进行测序;步骤五、将步骤四中Illumina测序仪的测序结果进行MNP标记基因型鉴定。

全文数据:

权利要求:

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