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申请/专利权人：世华医学科技(苏州)有限公司
摘要：本发明公开了一种构建杂交捕获测序文库的方法。所述方法包括以下步骤：1文库混合，按公式1计算子文库的体积，将子文库进行混合，得到混合文库；2文库杂交捕获，对所述混合文库进行纯化，并与杂交反应液混合进行预反应，加入捕获反应液进行捕获反应，进行洗脱及扩增，得到所述杂交捕获测序文库；本发明采用独特的杂交前文库混合策略，拓展杂交前文库混合方法的适用性，降低子文库质量、片段大小差异对预期数据产出的影响，提供了一种捕获效率高效、捕获均衡性好、操作简单且适应性广的杂交捕获方法。
主权项：1.一种构建杂交捕获测序文库的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：1文库混合按公式1计算子文库的体积，将子文库进行混合，得到混合文库，其中，Vn代表第n个子文库的体积，单位为μL；M代表混合文库质量，单位为ng；Fn代表第n个子文库的片段大小，单位为bp；Cn代表第n个子文库的质量浓度，单位为ngμL；Dn％代表第n个子文库的校正数据量占比，计算公式为公式2，Dn代表第n个子文库的数据量，单位为Gb，Rn代表第n个子文库的数据量校正系数，cfDNA和gDNA类子文库的R＝1，片段主峰大小1000bp的FFPE类子文库的R＝2，片段主峰大小为500～1000bp的FFPE类子文库的R＝3，片段主峰大小＜500bp的FFPE类子文库的R＝4； 2文库杂交捕获对所述混合文库进行纯化，并与杂交反应液混合进行预反应，加入捕获反应液进行捕获反应，进行洗脱及扩增，得到所述杂交捕获测序文库；步骤2所述纯化包括以下步骤：1’将所述混合文库与重复区域封阻序列混合；2’25～30℃孵育纯化磁珠20～30min，并加入步骤1’混合液中，25～30℃孵育5～15min；3’收集纯化磁珠，并使用80％酒精洗涤，进行干燥处理。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 世华医学科技(苏州)有限公司 一种构建杂交捕获测序文库的方法
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