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单细胞转录组测序文库的构建方法和测序方法,以及制备单细胞转录组文库的试剂盒 

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申请/专利权人:深圳华大生命科学研究院

摘要:提供了一种单细胞转录组测序文库的构建方法和测序方法,以及制备单细胞转录组文库的试剂盒。所述方法中,对单细胞悬液进行细胞或细胞核内原位逆转录,之后将该细胞或细胞核与磁珠超载到液滴中进行液滴PCR反应,之后回收所述磁珠并进行二次扩增、片段化文库构建,从而得到所述单细胞转录组测序文库。所述方法实现了经原位逆转录后的细胞或细胞核与经预处理的磁珠的超载,实现了单次实验获得十万个细胞级别的超高通量,并且表现出相当高的准确性。

主权项:一种单细胞转录组测序文库的构建方法,其特征在于,所述构建方法包括以下步骤:1对单细胞悬液进行细胞或细胞核内原位逆转录以产生带有第一标记的全长第一链cDNA;2将步骤1获得的经原位逆转录后的细胞或细胞核和用于第二链cDNA合成的PCR反应体系与能够识别所述第一标记的磁珠超载到液滴中,进行液滴PCR反应;3在所述液滴PCR反应结束后回收所述磁珠;4对在步骤3中获得的所述磁珠上的cDNA进行二次扩增;和5对在步骤4中获得的经二次扩增后的cDNA进行片段化文库构建,得到所述单细胞转录组测序文库。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 深圳华大生命科学研究院 单细胞转录组测序文库的构建方法和测序方法,以及制备单细胞转录组文库的试剂盒

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