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申请/专利权人：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
摘要：本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种在毕赤酵母中表达动物源IGF‑1与IGFBP3的IGF‑1结合区段复合物的方法。本申请在IGF‑1的N端融合它的内源结合蛋白IGFBP3的IGF‑1结合区段，获得正确折叠并稳定的蛋白复合物。本发明发现融合内源结合蛋白IGFBP3的IGF‑1结合区段,并在两个蛋白之间利用内源蛋白酶KEX2,在毕赤酵母系统直接实现了了IGFBP3的IGF‑1结合区段与IGF‑1的复合物的表达，该复合物具有细胞增殖活性，并且表达量达到0.5gL表达水平。
主权项：1.一种在毕赤酵母中表达动物源IGF-1与IGFBP3的IGF-1结合区段复合物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：合成优化的毕赤酵母偏爱的编码动物源IGF-1的基因、优化的毕赤酵母偏爱的编码动物源IGFBP3的IGF-1结合区段的基因，其中，所述动物源IGF-1为：牛源IGF-1，其氨基酸序列如SEQIDNO：1所示，或者猪源IGF-1，其氨基酸序列如SEQIDNO：1所示，或者鸡源IGF-1，其氨基酸序列如SEQIDNO：2所示，所述动物源IGFBP3的IGF-1结合区段为：猪源IGFBP3的IGF-1结合区段，其氨基酸序列如SEQIDNO：3所示，或者牛源IGFBP3的IGF-1结合区段，其氨基酸序列如SEQIDNO：4所示，或者鸡源IGFBP3的IGF-1结合区段，其氨基酸序列如SEQIDNO：5所示；构建融合表达载体，所述融合表达载体包括表达所述优化的毕赤酵母偏爱的编码动物源IGF-1的基因和所述优化的毕赤酵母偏爱的编码动物源IGFBP3的IGF-1结合区段的基因的表达盒；将构建的融合表达载体线性化后转化毕赤酵母，获得重组毕赤酵母，培养所述重组毕赤酵母，从而表达所述动物源IGF-1与IGFBP3的IGF-1结合区段复合物。
全文数据：
权利要求：
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