买专利卖专利找龙图腾，真高效！ 查专利查商标用IPTOP,全免费！专利年费监控用IP管家,真方便！

申请/专利权人：江苏恒顺醋业股份有限公司;江苏大学

摘要：本发明属于食品快速检测技术领域，具体涉及一种同时测定醋醅中黄曲霉毒素B1与呕吐毒素的检测方法，其特征在于，涉及一种基于表面增强拉曼光谱同时测定恒顺香醋食醋固态发酵醋醅中黄曲霉毒素B1AFB1与呕吐毒素DON的检测方法，本发明利用Fe3O4@citrate@PEI@Auseed@MPA纳米颗粒胶体作为探针，使其能通过永磁体具有快速分离和信号富集；还通过利用氨基末端的AFB1适配体与互补链以及DON适配体与互补链和羧基进行连接，用酰胺键来代替常用的金‑硫键，显然酰胺键的共振结构在酸性条件下更为稳定，并利用PEI作为中间包覆物，使其连接更为牢固,通过柠檬酸钠包覆的金纳米花来提高AFB1的检测精度。实现了醋醅中AFB1以及DON含量的同时进行有效检测。本发明将拉曼技术应用于醋醅中AFB1与DON的检测，检测速度快，结果较准确与HPLC结果误差率小于10％。

主权项：1.一种同时测定醋醅中黄曲霉毒素B1与呕吐毒素的检测方法，其特征在于，涉及一种基于表面增强拉曼光谱同时测定恒顺香醋食醋固态发酵醋醅中黄曲霉毒素B1AFB1与呕吐毒素DON的检测方法，具体包括以下步骤：S1绘制AFB1与DON标准曲线：S11：制备不同浓度的AFB1标准溶液、DON标准溶液、AFB1适配体互补链修饰的Tr-AuNFs@DTNB与DON适配体互补链修饰的Au@Ag@4-MBA的纳米材料基底以及AFB1适配体与DON适配体修饰的Fe3O4@citrate@PEI@Auseed@MPA的磁性纳米胶体探针；S12：分别取不同浓度的AFB1标准溶液、DON标准溶液，混合液的总体积记为V1；分别与V2体积的AFB1适配体互补链修饰的Tr-AuNFs@DTNB与V3体积的DON适配体互补链修饰的Au@Ag@4-MBA的纳米材料基底、V4体积的AFB1与DON适配体修饰的Fe3O4@citrate@PEI@Auseed@MPA磁性纳米胶体探针混合，得到不同浓度的混合胶体；并在35～40℃下进行孵育，孵育后用永磁体分离得到结合物，用磷酸盐缓冲PB溶液洗涤数次后，再用永磁体分离出结合物，最后重悬于去离子水中，其中重悬所用的去离子水的体积记为V5；最终得到不同浓度的结合物混合液；S13：取一定体积的结合物混合液滴加在硅片上，等液滴稳定后利用拉曼光谱仪进行光谱扫描获得拉曼光谱图；以DTNB的1334cm－1特征拉曼峰与4-MBA的1071cm－1特征拉曼峰作为定量基准峰，测定定量基准峰位移处的拉曼峰强度值I1和I2，以AFB1标准溶液浓度与DTNB特征峰对应的拉曼峰强度值I1绘制标准曲线,以DON标准溶液浓度与4-MBA相对应的拉曼峰强度值I2绘制标准曲线；S2待测样品溶液的制备：称取一定量的醋醅，质量记为w，加入乙腈水溶液，常温条件下震荡提取，得到粗提液；将粗提液进行离心，收集上清液，作为待测液，记录体积V0，冷冻备用；S3待测液的拉曼检测：取V1体积步骤S2制备得到的待测液加入到V2体积AFB1适配体互补链修饰的Tr-AuNFs@DTNB与V3体积的DON适配体互补链修饰的Au@Ag@4-MBA的纳米材料混合基底中，再加入V4体积的AFB1适配体与DON适配体修饰的Fe3O4@citrate@PEI@Auseed@MPA的磁性纳米胶体探针，混合均匀并在35～40℃下孵育，用永磁体分离得到结合物，用PB溶液洗涤数次后，再用永磁体分离出结合物重悬于水溶液中，得到结合物混合液，其中重悬所用的去离子水的体积记为V5；最后取结合物混合液滴加在硅片上，待液滴稳定后利用拉曼光谱仪进行光谱扫描获得拉曼光谱图；S4定量测定：根据步骤S3得到的待测液的拉曼光谱图，以DTNB与4-MBA的特征拉曼峰作为定量基准峰，测定定量基准峰位移处的拉曼峰强度值，并根据步骤S1得到的AFB1标准曲线以及DON标准曲线得到的待测液中AFB1及DON的浓度，分别记为m1、m2，进一步根据公式计算出醋醅样品中AFB1的含量x1；醋醅样品中DON的含量x2； x1：醋醅样品中AFB1的含量，μgkg；x2：醋醅样品中DON的含量，μgkg；m1：根据标准曲线得到的待测液中AFB1的浓度，μgL；m2：根据标准曲线得到的待测液中DON的浓度，μgL；V0：待测液体积，L；w：醋醅样品质量，kg。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 江苏恒顺醋业股份有限公司 江苏大学 一种同时测定醋醅中黄曲霉毒素B1与呕吐毒素的检测方法