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申请/专利权人:首都儿科研究所
摘要:本发明公开了一种用于核酸检测的CRISPR介导的单管一步法检测方法,具体地,其包括:(1)将待测样本的DNA模板、MCDA引物、DNA聚合酶、ApaCas12b‑gRNA复合物、荧光探针混合,得到反应体系;(2)在恒定温度下,将(1)中反应体系进行MCDA介导的等温扩增、基于CRISPRCas12b的反式切割反应;所述的MCDA引物包括置换引物、扩增引物、交叉引物,所述的交叉引物包含PAM位点,ApaCas12b‑gRNA复合物中gRNA与靶序列互补,所述的荧光探针为ssDNA探针。
主权项:1.一种非诊断目的的基于CRISPR的单管一步法检测靶序列的方法,其包括:(1)将待测样本的DNA模板、MCDA引物、DNA聚合酶、ApaCas12b-gRNA复合物、荧光探针混合,得到反应体系;(2)在恒定温度下,将(1)中反应体系进行MCDA介导的等温扩增、基于CRISPRCas12b的反式切割反应;所述的MCDA引物包括置换引物、扩增引物、交叉引物,所述的交叉引物包含PAM位点,ApaCas12b-gRNA复合物中gRNA与靶序列互补,所述的荧光探针为ssDNA探针。
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权利要求:
百度查询: 首都儿科研究所 一种用于核酸检测的CRISPR介导的单管一步法检测方法
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