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一种基于RPA-CRISPR/Cas12a检测麦角病菌的引物、试剂盒及检测方法 

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申请/专利权人:西北农林科技大学;西安黄氏生物工程有限公司

摘要:本发明提供了一种基于RPA‑CRISPRCas12a检测麦角病菌的引物,包括RPA上游引物、RPA下游引物和crRNA引物及通用引物,核苷酸序列如SEQIDNO.1~4所示;还提供了试剂盒,包括基于RPA‑CRISPRCas12a检测麦角病菌的引物、Cas12a蛋白、T7转录酶、DNA聚合酶、缓冲液、Cas1213专用核酸检测试纸条;还提供了检测方法:首先提取待测样品DNA,然后用RPA上、下游引物通过RPA扩增技术扩增靶标序列,随后以RPA扩增产物和crRNA、Cas12a蛋白、FB探针建立RPA‑CRISPRCas12a检测体系,得到RPA‑CRISPRCas12a反应产物,用Cas1213专用核酸检测试纸条进行检测。本发明基于RPA‑CRISPRCas12a检测麦角病菌的检测方法具有用时短、特异性强、灵敏度高、结果准确等优点。

主权项:1.一种基于RPA-CRISPRCas12a检测麦角病菌的引物,其特征在于,所述麦角病菌的拉丁学名为Clavicepspurpurea,所述检测麦角病菌的引物包括RPA上游引物、RPA下游引物和crRNA引物及通用引物,所述RPA上游引物为MJ-RPA-F,核苷酸序列如SEQIDNO.1所示;所述RPA下游引物为MJ-RPA-R,核苷酸序列如SEQIDNO.2所示;所述crRNA引物为MJ-crRNA,核苷酸序列如SEQIDNO.3所示;所述通用引物的核苷酸序列如SEQIDNO.4所示。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 西北农林科技大学 西安黄氏生物工程有限公司 一种基于RPA-CRISPR/Cas12a检测麦角病菌的引物、试剂盒及检测方法

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