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申请/专利权人：中国科学院地球环境研究所;西安地球环境创新研究院

摘要：本发明提供了一种用于放射性碳测年的骨胶原蛋白提取方法；包括：步骤1，清理表面污染及网状部分，粉碎骨样并称重；步骤2，加酸液于骨头样品中；步骤3，加入配置的碱液；步骤4，再加酸液进行水解；步骤5，过滤，得明胶溶液，冷冻干燥；步骤6，称冷冻干燥后的明胶重量；步骤7，规范清洗截留分子量为30kDa的超滤膜，溶解胶原上样，进行离心，将超滤内管中的剩余液体倒入原样离心管中，并进行冷冻干燥，称重，并记录重量；步骤8，称取适量明胶样或超滤后的胶原组分进行石墨样品制备实验。本发明所涉及的方法可以针对不同保存类型的骨头进行提取；本发明方法简单，易操作，成本低；本发明所涉及的方法提高了年龄测定数据的准确性和可靠性。

主权项：1.一种用于放射性碳测年的骨胶原蛋白提取方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，古骨头样品观察并拍照，先用超纯水超声清洗，低温晾干，取骨致密部分并将表面污染及网状部分刮除，然后粉碎样品并称重，记录骨头样品重量；步骤2，加酸液于骨头样品中，室温下放置并进行搅拌，隔2-3天换新鲜的酸液，浸泡至无气泡后，水洗至中性；步骤3，加入配置的碱液，室温放置30min，水洗至中性；步骤4，再加酸液，浸泡，水洗至pH为弱酸性，控制溶液体积为15-20ml，放置于75℃的水浴锅中进行水解，得水解液；步骤5，用超纯水清洗玻璃纤维滤膜将水解清液热过滤，得到明胶溶液，并进行真空冷冻干燥；步骤6，冻干后，称得到的明胶重量，计算骨胶原百分含量，并进行C％，N％，CN，δ13C，δ15N的指标测试；步骤7，规范清洗截留分子量为30kDa的超滤膜，溶解胶原上样，平衡离心管，进行离心，将超滤内管中的剩余液体倒入原样离心管中，并进行冷冻干燥，称重，并记录重量；步骤8，称取适量明胶样或超滤后的胶原组分进行石墨样品制备实验。步骤1中，所述超声清洗的时间为2-3分钟，所述粉碎后样品的粒径为1-2毫米；步骤2中，所述酸液为0.5MHCl，所述更换酸液至少2-3次；步骤3中，所述碱液为0.1MNaOH溶液；步骤4中，所述酸液为0.5MHCl，所述浸泡的时间为1小时，所述水解液的pH稀释至3-4，所述水解的温度为75℃，水解的时间为20小时；步骤5中，所述冷冻的时间为48小时；步骤7中，所述规范清洗超滤膜为润洗+离心+超声各3次。步骤8中，所述用骨胶原样品进行14C测年分析。

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