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申请/专利权人：山东杰乐生物科技有限公司

摘要：本发明公开一种抗衰鱼胶原蛋白肽的制备方法和应用，属于胶原蛋白肽技术领域。本发明设计了前处理、脱钙处理以及预处理工序，碳酸钠溶液以及异丙醇的处理，有效去除鱼鳞残留的杂蛋白、色素以及脂肪等成分，使用弱酸柠檬酸进行加热脱钙处理，极大程度的降低了传统盐酸处理造成的胶原蛋白的损失。后续，本发明使用丝氨酸、月桂醇硫酸钠和苹果酸组成的预处理液，从低浓度到高浓度的浸泡和超声处理，使得鱼鳞表面骨质层结构变得更加疏松有利于后续的酶解。使用碱性蛋白酶以及微生物蛋白酶对鱼鳞进行高效的酶解，得到大量小分子的胶原蛋白肽，所得胶原蛋白肽为白色无味粉末，灰分含量小于0.5％，分子量小于10000Da。

主权项：1.一种抗衰鱼胶原蛋白肽的制备方法，其特征在于，包括以下制备步骤：（1）前处理：将干燥的鱼鳞粉碎后置于容器中，加入碳酸钠溶液搅拌浸泡12-24h，用蒸馏水冲洗至pH=6-7，晾干；按照料液比1g∶10mL的比例加入质量浓度为10%异丙醇，搅拌浸泡10-24h进行脱脂处理，蒸馏水洗净至无异丙醇味，晾干；（2）脱钙处理：将步骤（1）处理得到的鱼鳞按照固液比1g：20mL置于柠檬酸溶液中，加热浸泡8h后，用蒸馏水洗涤鱼鳞至中性，放入40-50℃烘箱中烘干备用；（3）预处理：将步骤（2）得到的鱼鳞按照固液比1g：50mL浸泡于质量浓度为1-2%的预处理液中，并同时进行超声处理1h；处理完成后离心分离，将得到的鱼鳞再次按照固液比1g：50mL浸泡于质量浓度为9-10%的预处理液中，并同时进行超声处理1h；处理完成后离心分离，将得到的鱼鳞按照固液比1g：50mL再次浸泡于质量浓度为19-20%的预处理液中，并同时进行超声处理1h，处理完成后，放入40-50℃烘箱中烘干备用；（4）酶解：将步骤（3）所得预处理鱼鳞于120-121℃下高压灭菌15min后，按照固液比1g：80mL加入无菌水进行匀浆处理，再加入浆料质量0.5-1%的复合蛋白酶进行酶解，期间间歇搅拌直至鱼鳞固体全部消失，酶解结束后于85-95℃灭酶10-30min，冷却至50-60℃后，过滤去除不溶性残渣，得粗酶解液；（5）用超滤设备对酶解液进行超滤，得到胶原蛋白肽液，冷冻干燥后得到终产品抗衰鱼胶原蛋白肽。

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