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申请/专利权人：广州中医药大学(广州中医药研究院)
摘要：本发明提供了龟板提取物联合肉豆蔻酸胆固醇的用途，所述用途为将龟板提取物联合肉豆蔻酸胆固醇用于诱导人诱导多能干细胞向皮肤类器官分化。本发明还提供了皮肤类器官的培养方法，包括诱导分化阶段：使用含肉豆蔻酸胆固醇的第一阶段诱导分化培养基将人诱导多能干细胞向外胚层及表皮外胚层诱导，随后使用含龟板提取物的第二阶段诱导分化培养基将外胚层细胞向颅神经嵴细胞诱导；诱导成熟阶段：先后采用第三阶段和第四阶段成熟培养基诱导培养毛囊的发育及成熟。本发明发现人诱导多能干细胞先使用含肉豆蔻酸胆固醇的培养基培养，再使用含龟板提取物的培养基培养，可使诱导率高达63.89%±6.365%。本发明方法诱导效率高，大规模应用前景好。
主权项：1.龟板提取物联合肉豆蔻酸胆固醇在诱导人诱导多能干细胞向皮肤类器官分化中的应用，其特征在于，所述龟板提取物的提取试剂为乙酸乙酯；所述应用的步骤包括：将人诱导多能干细胞培养至形成细胞聚集体，利用第一阶段诱导分化培养基重悬所述细胞聚集体，然后将所述细胞聚集体接种于细胞培养板中进行诱导分化培养；所述第一阶段诱导分化培养基为包含以下浓度组分的基础培养基：1μM~20μMSB431542、1μM~200μM所述肉豆蔻酸胆固醇、1vv%~5vv%MatrixBasementMembrane；当诱导分化培养形成外胚层及表皮外胚层细胞后，向所述细胞培养板中加入第二阶段诱导分化培养基继续诱导分化培养；所述第二阶段诱导分化培养基为包含以下浓度组分的基础培养基：100ngmL~1000ngmLLDN193189和0.1μgmL~50μgmL所述龟板提取物。
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百度查询： 广州中医药大学(广州中医药研究院) 龟板提取物联合肉豆蔻酸胆固醇的用途
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