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申请/专利权人：美康生物科技股份有限公司
摘要：本发明提供了一种293T细胞瞬时表达目标蛋白的方法及其应用，方法包括以下步骤：S10：获得目标DNA和293T细胞，进行转染，获得转染后的293T细胞；S20：对转染后的293T细胞进行培养，并添加培养基以及组蛋白去乙酰化酶抑制剂和或铜离子；S30：维持培养温度低于37℃，并进行补料，获得补料后的293T细胞上清；S40：对补料后的293T细胞上清进行纯化，获得目标蛋白。本发明解决了当前重组蛋白在293T细胞瞬时表达水平低，导致生产成本较高的技术问题，实现了提高重组蛋白在293T细胞瞬时表达水平，降低生产成本的技术效果。
主权项：1.一种293T细胞瞬时表达目标蛋白的方法，其特征在于，包括以下步骤：S10：获得目标DNA和293T细胞，进行转染，获得转染后的293T细胞；S20：对所述转染后的293T细胞进行培养，并添加Trans293培养基以及组蛋白去乙酰化酶抑制剂和铜离子；S30：在所述转染后的第三天，维持培养温度为33℃，并且每天进行补料，培养5-14天，获得补料后的293T细胞上清；S40：对所述补料后的293T细胞上清进行纯化，获得目标蛋白；其中，所述组蛋白去乙酰化酶抑制剂为丁酸钠，所述丁酸钠的浓度为0.5mmolL；所述铜离子为添加硫酸铜，所述硫酸铜的浓度为0.2mmolL；所述补料的添加物为RAPIDFeed19A和RAPIDFeed19B，且RAPIDFeed19A和RAPIDFeed19B的质量比为10：1；所述添加物的体积为所述Trans293培养基的体积的3%；所述获得转染后的293T细胞，包括以下步骤：S11：混合目标DNA与转染试剂，获得DNA-转染试剂混合液；S12：将所述DNA-转染试剂混合液加入293T细胞培养液中，获得所述转染后的293T细胞；其中，目标DNA与所述转染试剂的质量比为1：4；所述转染试剂为PEI。
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权利要求：
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