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申请/专利权人：山东宏济堂制药集团股份有限公司

摘要：本发明公开了一种黄秋葵嫩果中黄酮类成分含量的一测多评测定方法，属于中药检测技术领域，其以异槲皮苷为内参物，通过计算槲皮素‑3‑O‑龙胆二糖苷、槲皮素‑3‑O‑木糖‑1‑2‑葡萄糖、槲皮素‑3‑O‑6”‑O‑丙二酰基‑葡萄糖苷的相对校正因子，快速、准确的检测了4种黄酮类成分的含量，解决了除异槲皮苷外其余三种成分对照品均不易获得、价格昂贵，导致检测成本高的问题；解决了槲皮素‑3‑O‑6”‑O‑丙二酰基‑葡萄糖苷成分溶液状态不稳定，易转化为异槲皮苷，导致含量测定不准确的问题；解决了传统干燥方式所造成的黄酮类成分含量变化的问题，能够准确揭示黄秋葵嫩果中黄酮类成分的真实情况。

主权项：1.黄秋葵嫩果中黄酮类成分含量的一测多评测定方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、确定高效液相色谱分析法的色谱条件：色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，0.2％磷酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱；检测波长为258nm，流速为1.0mLmin，柱温为30℃，进样量为10μL；S2、制备系列对照品溶液，包括槲皮素-3-O-龙胆二糖苷、槲皮素-3-O-木糖-1-2-葡萄糖、异槲皮苷的系列混合对照品溶液，以及系列槲皮素-3-O-6”-O-丙二酰基-葡萄糖苷对照品溶液：S3、确定相对校正因子：S3.1分别吸取系列混合对照品溶液、系列槲皮素-3-O-6”-O-丙二酰基-葡萄糖苷对照品溶液，按步骤S1中色谱条件依次进样分析，记录色谱峰面积，以峰面积为纵坐标，对照品溶液的浓度为横坐标，绘制标准曲线，得到各待测成分的线性回归方程；其中，槲皮素-3-O-6”-O-丙二酰基-葡萄糖苷对照品溶液在制备后12h内使用；S3.2以异槲皮苷为内参物，按照线性回归方程，计算槲皮素-3-O-龙胆二糖苷、槲皮素-3-O-木糖-1-2-葡萄糖、槲皮素-3-O-6”-O-丙二酰基-葡萄糖苷的相对校正因子；S4、制备供试品溶液：S4.1取黄秋葵嫩果，采用真空冷冻干燥，制成黄秋葵干燥药材；S4.2将黄秋葵干燥药材粉碎制得粉末，过筛，取1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70％乙醇50mL，称定重量，超声处理30min，取出，放冷，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；S5、供试品溶液中待测成分含量的测定：吸取供试品溶液和混合对照品溶液，按照步骤S1中色谱条件进行高效液相色谱分析，根据各待测成分相对于异槲皮苷的相对保留时间定位各色谱峰，以异槲皮苷对照品溶液的浓度和峰面积为对照，根据步骤S3确定的相对校正因子，分别计算得到供试品溶液中槲皮素-3-O-龙胆二糖苷、槲皮素-3-O-木糖-1-2-葡萄糖、槲皮素-3-O-6”-O-丙二酰基-葡萄糖苷的含量；其中，供试品溶液在制备之后24h内使用。

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