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一种稳定表达FGF8基因的重组慢病毒表达质粒、重组慢病毒表达载体以及A549细胞系及应用 

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申请/专利权人:山东省农业科学院家禽研究所(山东省无特定病原鸡研究中心);山东省农业科学院畜牧兽医研究所

摘要:本发明涉及基因工程技术领域,具体涉及一种稳定性表达FGF8基因的重组慢病毒表达质粒、重组慢病毒表达载体以及A549细胞系及应用。本发明以FGF8基因为目的基因,将其通过基因工程成功建立了稳定性表达FGF8基因的A549细胞系。通过实验发现,稳定性表达FGF8基因的A549细胞系可以过表达FGF8基因。分别利用H1亚型猪流感病毒以及H13亚型禽流感病毒感染稳定性表达FGF8基因的A549细胞系,发现其以显著增强H1亚型猪流感病毒以及H13亚型禽流感病毒的复制。

主权项:1.一种稳定性表达FGF8基因的重组慢病毒表达质粒,其特征在于,其构建方法包括:1利用PCR扩增FGF8基因序列,PCR产物经琼脂糖凝胶电泳后进行胶回收;2利用限制性内切酶Xhol和EcoRI双酶切pLVX-FLAG-Puro质粒,酶切产物经琼脂糖凝胶电泳后进行胶回收;3将步骤1和步骤2中回收的产物无缝拼接,将无缝拼接产物转化DH5α感受态细胞,对得到的单克隆菌落进行测序,获得阳性克隆;将阳性克隆转接培养后,进行质粒抽提,获得稳定性表达FGF8基因的重组慢病毒表达质粒。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 山东省农业科学院家禽研究所(山东省无特定病原鸡研究中心) 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 一种稳定表达FGF8基因的重组慢病毒表达质粒、重组慢病毒表达载体以及A549细胞系及应用

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