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申请/专利权人：桂林电子科技大学

摘要：一种基于RGO‑CeO2‑AuNPs构建检测GPC3的夹心型适配体传感器。一种基于氧化还原石墨烯‑氧化铈‑金纳米复合材料构建检测GPC3的夹心型电化学适配体传感器。首先制备高比表面积、优秀导电性和优秀电化学活性的RGO‑CeO2‑AuNPs。然后搭配GPC3Apt偶联为信号探针，构建形成GPC3Apt‑GPC3‑GPC3Apt的3D夹心型空间结构。最终利用DPV法记录RGO‑CeO2‑Au中CeO2的氧化电流峰值变化，实现高特异性高灵敏度检测GPC3。该传感器稳定性强、重现性好，灵敏度高，最低检测限达0.74pgmL。

主权项：1.一种基于还原性氧化石墨烯-氧化铈-金纳米复合材料RGO-CeO2-AuNPs构建检测GPC3的夹心型电化学适配体传感器，按以下步骤进行：步骤1：制备氧化还原石墨烯-氧化铈-金-GPC3适配体RGO-CeO2-Au-GPC3Apt信号探针（1）制备氧化还原石墨烯RGO：将氧化石墨烯GO溶于水中，超声破碎，得到GO溶液；向GO溶液中加入抗坏血酸，搅拌、干燥、得到RGO溶液；（2）制备氧化还原石墨烯-氧化铈纳米复合材料RGO-CeO2NPs：将六水硝酸铈和过氧化氢混合溶液中加入到尿素和柠檬酸钠溶液中，搅拌，进行水热还原反应，得到CeO2溶液；离心、洗涤、干燥；得到CeO2纳米晶体；将RGO溶液与CeO2溶液和聚乙烯吡咯烷酮混合，搅拌，干燥，得到RGO-CeO2NPs；（3）制备氧化还原石墨烯-氧化铈-金纳米复合材料RGO-CeO2-AuNPs：将氯金酸溶解在水中，加热至沸腾；搅拌加入柠檬酸钠溶液，加热至沸腾；得到Au纳米溶液；将RGO-CeO2NPs溶液与Au纳米溶液和聚乙烯吡咯烷酮混合，干燥，得到RGO-CeO2-AuNPs；（4）构建氧化还原石墨烯-氧化铈-金-GPC3适配体RGO-CeO2-Au-GPC3Apt信号探针:将RGO-CeO2-AuNPs与氨基修饰的GPC3Apt震荡混合，孵育过夜；加入牛血清白蛋白BSA溶液，进行封闭，常温孵育；离心，洗涤；去除上层游离GPC3Apt，得到RGO-CeO2-Au-GPC3Apt溶液；步骤2：电极的修饰与生物传感界面的构建（1）SPE的活化：将SPE置于稀硫酸H2SO4中，通过电化学工作站利用循环伏安法进行电极活化，清洗，干燥，得到经活化SPE；（2）制备GPC3AptSPE传感界面：将GPC3Apt滴加SPE表面，孵育，清洗，干燥；滴加BSA溶液，干燥，得到RGO-CeO2-Au-GPC3Apt；（3）构建RGO-CeO2-Au-GPC3AptGPC3AptSPE电化学适配体传感器：取RGO-CeO2-Au-GPC3Apt滴加到GPC3AptSPE表面，孵育，清洗、干燥；得到RGO-CeO2-Au-GPC3AptGPC3AptSPE电化学适配体传感器；步骤3：GPC3的工作曲线绘制（1）取标准GPC3溶液滴加到RGO-CeO2-Au-GPC3AptGPC3AptSPE电化学适配体传感器中，孵育，清洗、干燥；得到RGO-CeO2-Au-GPC3AptGPC3GPC3AptSPE工作电极；（2）取工作电极浸泡磷酸缓冲盐溶液PBs中，通过电化学工作站采用差分脉冲伏安法DPV进行扫描，记录其电流峰值；（3）对不同浓度的GPC3溶液进行检测，记录电流峰值；根据传感器的电流响应值与GPC3浓度的关系，绘制工作曲线，计算出该方法的最低检测限；步骤4：实际血清样本中GPC3的检测（1）在步骤2得到的电化学适配体传感器上，滴加待测实际血清样本，孵育、清洗、干燥、得到工作电极；（2）将工作电极放入PBs溶液中，采用电化学工作站的DPV扫描，记录其峰电流；（3）根据步骤3所述的工作曲线，计算求出所述待测实际样品中GPC3的浓度。

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