申请/专利权人：江汉大学

申请日：2022-02-28

公开（公告）日：2024-07-05

公开（公告）号：CN114507749B

主分类号：C12Q1/6895

分类号：C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.07.05#授权;2022.06.03#实质审查的生效;2022.05.17#公开

摘要：本申请涉及生物技术领域，尤其涉及一种准确检测玉米转基因成分的引物组、试剂盒及方法；所述引物组包括36对检测引物对，36对检测引物对的核苷酸序列分别如SEQIDNO.1～SEQIDNO.72所示；2对扩增引物对的核苷酸序列分别如SEQIDNO.73～SEQIDNO.76所示；所述试剂盒包括引物组；所述方法包括：分别得到核苷酸序列；根据核苷酸序列，分别设计出引物组；提取待检样品的基因组DNA，得到待测玉米转基因成分的基因组DNA；以基因组DNA为模板，以引物组为扩增体系进行扩增反应，得到扩增产物；将扩增产物进行高通量测序，得到高通量测序数据；将高通量进行基因分析，确定待测玉米样品中是否含有转基因成分；通过设计出的引物组，能够实现在同一PCR反应中实现多个靶标分子的同时检测。

主权项：1.一种准确检测玉米转基因成分的引物对组合物，其特征在于，所述引物对组合物包括36对检测引物对和2对扩增引物对，所述36对检测引物对用于检测玉米中35种转基因元件，35种所述转基因元件包括p35S、t35S、pNOS、tNOS、tPINⅡ、pRBCS4、tE9、Bar、PAT、HPT、GUS、Cry1Ab-Ac、Cry1A.105、Cry9C、Vip3Aa、Cry2Ab、G10evo-EPSPS、amy797E、AAD-1、eCry3.1Ab、tORF25、Cry34Ab1、Cry35Ab1、pRice_actin、pFMV35S、cry1F、CTP2、tahsp17、zmhsp、Adh1、GOX、2mepsps、cry3Bb1、cry3A和pmi，其中，36对所述检测引物对的核苷酸序列分别如下所示：特异性扩增p35S的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.1至SEQIDNO.2所示；特异性扩增t35S的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.3至SEQIDNO.4所示；特异性扩增pNOS的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.5至SEQIDNO.6所示；特异性扩增tNOS的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.7至SEQIDNO.8所示；特异性扩增tPINⅡ的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.9至SEQIDNO.10所示；特异性扩增pRBCS4的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.11至SEQIDNO.12所示；特异性扩增tE9的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.13至SEQIDNO.14所示；特异性扩增Bar的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.15至SEQIDNO.16所示；特异性扩增PAT的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.17至SEQIDNO.18所示；特异性扩增HPT的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.19至SEQIDNO.20所示；特异性扩增GUS的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.21至SEQIDNO.22所示；特异性扩增Cry1Ab-Ac的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.23至SEQIDNO.24所示；特异性扩增Cry1A.105的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.25至SEQIDNO.26所示；特异性扩增Cry9C的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.27至SEQIDNO.28所示；特异性扩增Vip3Aa的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.29至SEQIDNO.30所示；特异性扩增Cry2Ab的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.31至SEQIDNO.32所示或者如SEQIDNO.63至SEQIDNO.64所示；特异性扩增G10evo-EPSPS的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.33至SEQIDNO.34所示；特异性扩增amy797E的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.35至SEQIDNO.36所示；特异性扩增AAD-1的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.37至SEQIDNO.38所示；特异性扩增eCry3.1Ab的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.39至SEQIDNO.40所示；特异性扩增tORF25的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.41至SEQIDNO.42所示；特异性扩增Cry34Ab1的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.43至SEQIDNO.44所示；特异性扩增Cry35Ab1的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.45至SEQIDNO.46所示；特异性扩增pRice_actin的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.47至SEQIDNO.48所示；特异性扩增pFMV35S的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.49至SEQIDNO.50所示；特异性扩增cry1F的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.51至SEQIDNO.52所示；特异性扩增CTP2的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.53至SEQIDNO.54所示；特异性扩增tahsp17的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.55至SEQIDNO.56所示；特异性扩增zmhsp的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.57至SEQIDNO.58所示；特异性扩增Adh1的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.59至SEQIDNO.60所示；特异性扩增GOX的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.61至SEQIDNO.62所示；特异性扩增2mepsps的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.65至SEQIDNO.66所示；特异性扩增cry3Bb1的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.67至SEQIDNO.68所示；特异性扩增cry3A的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.69至SEQIDNO.70所示；特异性扩增pmi的引物对，其核苷酸序列如SEQIDNO.71至SEQIDNO.72所示；2对所述扩增引物对的核苷酸序列分别如SEQIDNO.73~SEQIDNO.76所示。

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百度查询： 江汉大学 一种准确检测玉米转基因成分的引物组、试剂盒及方法

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