申请/专利权人：东北林业大学

申请日：2021-04-12

公开（公告）日：2024-07-05

公开（公告）号：CN113150773B

主分类号：C09K11/06

分类号：C09K11/06;G01N21/64

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.07.05#授权;2021.09.21#实质审查的生效;2021.07.23#公开

摘要：一种利用牛血清白蛋白为支架的化学荧光探针检测水果中乙烯的方法，它涉及一种水果中乙烯的检测方法。本发明的目的是解决乙烯检测过程中易受环境干扰，检测时间长以及选择性差等问题。制备方法：一、制备1‑乙烯基芘；二、制备钌基复合物；三、制备牛血清白蛋白为支架的化学荧光探针。使用方法：将抽取的水果样品中的乙烯气体加入到制备的牛血清白蛋白为支架的化学荧光探针水溶液中，恒温孵育后进行荧光检测。本发明不仅操作简单安全，而且所制备的牛血清白蛋白为支架的化学荧光探针具有选择性高、水溶性好、检测时间短等优点。

主权项：1.一种牛血清白蛋白为支架的化学荧光探针的制备方法，其特征在于它按以下步骤制备的：一、制备1-乙烯基芘：室温下将叔丁醇钾和甲基三苯基溴化磷加入到无水四氢呋喃中，在200rpm～300rpm转速条件下进行预混合，再加入1-芘甲醛继续反应7～9h，并用1mmolL盐酸中和溶液；然后用乙酸乙酯萃取所需产物，粗产物用硅胶柱色谱纯化，并用洗脱剂洗脱，随后在40℃～50℃下旋转蒸发除去溶剂后，在50℃～70℃下真空干燥24h～36h，得到黄色固体，即1-乙烯基芘；步骤一中所述1-芘甲醛与甲基三苯基溴化磷的摩尔比为1：1.5～2.5；步骤一中所述1-芘甲醛与叔丁醇钾与的摩尔比为1：1.5～2.5；步骤一中所述1-芘甲醛与无水四氢呋喃体积比为1g：30mL～35mL；二、制备钌基复合物：室温下将第一代Grubbs催化剂[二三环己基膦亚苄基二氯化钌]和1-乙烯基芘加入到无水二氯甲烷中，在200rpm～300rpm转速条件下预混合30min～40min；在40℃～50℃下旋转蒸发除去溶剂，洗涤残留物，在50℃～70℃下真空干燥24h～36h，得到卡其色固体，即钌基复合物；步骤二中所述第一代Grubbs催化剂与1-乙烯基芘的摩尔比为1：10～12；步骤二中所述第一代Grubbs催化剂与无水二氯甲烷体积比为1mg：0.1mL～0.2mL；三、制备牛血清白蛋白为支架的化学荧光探针：室温下将PBS缓冲溶液pH＝7.4,50mmolL，60μM牛血清白蛋白水溶液，50μM钌基复合物1,4-二氧六环溶液，体积分数为15％的1,4-二氧六环水溶液分别加入到小口螺纹玻璃样品瓶中，转移至恒温培养箱培育2h～3h；旋转蒸发以浓缩溶液，加入1mL～3mL高纯水，即得牛血清白蛋白为支架的化学荧光探针溶液；步骤三中所述60μM牛血清白蛋白水溶液与PBS缓冲溶液的体积比为1：9～11；步骤三中所述60μM牛血清白蛋白水溶液与50μM钌基复合物1,4-二氧六环溶液的体积比为1：0.5～1.5；步骤三中所述钌基复合物储备液与体积分数为15％的1,4-二氧六环水溶液的体积比为1：7～9。

全文数据：

权利要求：

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