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一种猪口蹄疫病毒单克隆抗体的制备方法 

申请/专利权人:国药集团动物保健股份有限公司

申请日:2024-05-11

公开(公告)日:2024-07-05

公开(公告)号:CN118290577A

主分类号:C07K16/10

分类号:C07K16/10

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.07.23#实质审查的生效;2024.07.05#公开

摘要:本发明公开一种猪口蹄疫病毒单克隆抗体的制备方法,涉及单克隆抗体制备技术领域。所述猪口蹄疫病毒单克隆抗体的制备方法包括:S10、筛选制备抗体的目的抗原表位;S20、确定多肽的序列,并将多肽序列外送公司合成多肽;S30、将多肽制备成免疫原;S40、向小鼠注射免疫原,免疫方式为足垫免疫;S50、筛选能分泌抗体的阳性杂交瘤细胞株;S60、将阳性杂交瘤细胞株注射到动物腹腔进行腹水制备,纯化腹水获得猪口蹄疫病毒单克隆抗体。与现有制备方法相比,本发明制备猪口蹄疫病毒单克隆抗体的方法,降低了抗原制备难度,免疫刺激效果好,使用微量抗原用量即可制备猪口蹄疫病毒单克隆抗体,还能减少免疫次数,缩短抗体制备周期。

主权项:1.一种猪口蹄疫病毒单克隆抗体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:S10、对O型猪口蹄疫病毒VP1蛋白的氨基酸序列进行序列比对、抗原表位预测及分析,筛选制备抗体的目的抗原表位;S20、确定多肽的序列,并将多肽的序列提交生物公司进行合成,得到多肽,所述多肽的序列包含目的抗原表位的重复序列与信号肽序列,所述信号肽为免疫细胞识别的信号肽;S30、将所述多肽溶解,用弗式佐剂进行乳化,制备成免疫原;S40、对小鼠注射所述免疫原,所述免疫方式为足垫免疫;S50、对免疫鼠血清的抗体进行效价检测,将抗体效价满足要求的小鼠的脾细胞和骨髓瘤细胞融合,获得杂交瘤细胞株,从所述杂交瘤细胞株筛选出能分泌抗体的阳性杂交瘤细胞株;S60、将阳性杂交瘤细胞株注射到动物腹腔进行腹水制备,收获腹水,纯化后得到猪口蹄疫病毒单克隆抗体。

全文数据:

权利要求:

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