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THP-1诱导分化为巨噬细胞的方法及其在构建巨噬-肿瘤杂合细胞模型中的应用 

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申请/专利权人:中国人民解放军海军军医大学

摘要:本发明涉及生物技术领域,提供了THP‑1诱导分化为巨噬细胞的方法及其在构建巨噬‑肿瘤杂合细胞模型中的应用。诱导分化方法如下:1将处于对数生长期的THP‑1细胞离心,用含10%胎牛血清以及1%双抗的RPMI1640培养基重悬,并在培养基中加入诱导剂;2细胞经计数后,用含所述诱导剂的RPMI1640培养基调整THP‑1细胞密度为5×105个mL,并将细胞种入六孔板,培养一定时间后,显微镜下观察THP‑1细胞由悬浮细胞分化为贴壁细胞,说明巨噬细胞诱导成功;采用含吞噬活性促进剂的培养基换液处理获得目标巨噬细胞。巨噬‑肿瘤杂合细胞模型构建方法如下:将巨噬细胞和癌细胞均消化为单细胞后,以密度比为1:4的比例将巨噬细胞和癌细胞于低粘附U型底孔板中进行共培养2小时。本发明获取具有高吞噬活性的巨噬细胞前后需要3天的时间,操作简单、快速、背景噪声低,同时避免伦理学限制。同时本发明杂合细胞的融合率可达5%~10%,较其他方法提高5倍左右。

主权项:1.一种THP-1诱导分化为巨噬细胞的方法,其特征在于,包括如下步骤:1将处于对数生长期的THP-1细胞离心,用含10%胎牛血清以及1%双抗的RPMI1640培养基重悬,并在培养基中加入诱导剂;2细胞经计数后,用含所述诱导剂的RPMI1640培养基调整THP-1细胞密度为5×105个mL,并将细胞种入六孔板,培养一定时间后,显微镜下观察THP-1细胞由悬浮细胞分化为贴壁细胞,说明巨噬细胞诱导成功;3采用含吞噬活性促进剂的培养基换液处理获得目标巨噬细胞。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 中国人民解放军海军军医大学 THP-1诱导分化为巨噬细胞的方法及其在构建巨噬-肿瘤杂合细胞模型中的应用

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