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一种Boc-人胰岛素融合蛋白包涵体的高效复性液及其复性方法 

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申请/专利权人:苏州鲲鹏生物技术有限公司

摘要:本发明涉及一种Boc‑人胰岛素融合蛋白包涵体的高效复性液及其复性方法。具体地,本发明提供一种Boc‑人胰岛素融合蛋白的复性方法,所述的方法包括步骤:1将含有Boc‑人胰岛素融合蛋白的包涵体进行裂解,得到裂解混合液,向所述的裂解混合液中加入变性溶液,得到Boc‑人胰岛素融合蛋白变性溶液;2将所述Boc‑人胰岛素融合蛋白变性溶液与复性液混合后进行反应,得到复性的Boc‑人胰岛素融合蛋白。本发明所述的方法能够提高复性效率。

主权项:1.一种Boc-人胰岛素融合蛋白的复性方法,其特征在于,所述的方法包括步骤:1将含有Boc-人胰岛素融合蛋白的包涵体进行裂解,得到裂解混合液,向所述的裂解混合液中加入变性溶液,调节pH为8.0-11.0,得到Boc-人胰岛素融合蛋白变性溶液;其中,所述的Boc-人胰岛素融合蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.:1所示,且第83位赖氨酸为Nε-叔丁氧羰基-赖氨酸;所述步骤1中,所述的变性溶液包括变性剂,所述的变性剂为β-巯基乙醇,β-巯基乙醇的浓度为5-50mmolL;2将所述Boc-人胰岛素融合蛋白变性溶液与复性液混合后进行反应,得到复性的Boc-人胰岛素融合蛋白;其中,所述的复性液由以下成分组成:20-80mmolLTris、3-20mmolLNa2CO3、20-80mmolL甘氨酸、20-250mmolLNaCl、0.1-1mmolLEDTA和0.1-5mmolL胱氨酸,溶剂为水,且pH为9.0-12;并且,所述步骤2中,在反应过程中,以2-100cm3H的速率向反应体系中通入空气。

全文数据:

权利要求:

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