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申请/专利权人：中国人民解放军总医院第八医学中心
摘要：本发明公开了一种结核分枝杆菌包涵体蛋白复性的方法及其专用复性缓冲液。实验证明，采用本发明提供的复性缓冲液可以复性结核分枝杆菌蛋白W544蛋白，复性得到的W544蛋白能有效刺激结核分枝杆菌感染小鼠的脾淋巴细胞产生免疫反应，同时不刺激健康小鼠的脾淋巴细胞产生免疫反应。由此可见，复性的W544蛋白具有很好的免疫原性。本发明提供的复性缓冲液及依据其建立的结核分枝杆菌包涵体蛋白复性方法具有重要的应用价值。
主权项：1.一种结核分枝杆菌包涵体蛋白复性的方法，包括如下步骤：（1）将1体积份结核分枝杆菌包涵体蛋白溶液和（0.5-1.5）体积份复性缓冲液混合，3-5℃静置0.5h-1.5h；所述复性缓冲液的溶质及其浓度为左旋精氨酸0.8-1.2M、氯化钠0.1-0.3M、三羟甲基氨基甲烷0.03-0.07M、β-环状糊精1.3-1.7%、Tween200.05-0.15%，溶剂为水，pH7.5-8.5；（2）向完成步骤（1）的体系中加入（2.5-3.5）体积份所述复性缓冲液，混合，3-5℃静置0.5h-1.5h，得到复性产物；（3）完成步骤（2）后，将所述复性产物装入超滤离心管，离心超滤；（4）将完成步骤（3）的体系继续离心超滤2次以上，获得上清液；每次超滤的方法为：加入所述复性缓冲液，离心超滤；上清液即为结核分枝杆菌蛋白溶液；所述结核分枝杆菌蛋白为W544蛋白；W544蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO：1所示。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 中国人民解放军总医院第八医学中心 一种结核分枝杆菌包涵体蛋白复性的方法及其专用复性缓冲液
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