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一种基于心血管芯片模型的深海生物毒素的致伤评价方法与应用 

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摘要:本发明公开了一种基于心血管芯片模型的深海毒素致伤评价方法,首先建立了心血管芯片模型,模拟心血管结构与功能,包括血管表面的糖萼组织;分别考察了四种深海重要生物毒素,即大田软海绵酸OA、芋螺毒素CTX、河豚毒素TTX和环亚胺毒素GYM在心血管芯片模型上的毒性效应,每个毒素设置低、中、高三个浓度梯度,结果发现,OA、CTX、TTX和GYM对脐静脉内皮细胞HUVEC增殖具有一定的影响,对芯片模型的糖萼损伤呈现出一定的量‑毒效应,随着浓度增加,糖萼损伤愈发严重。考察了雷公藤甲素对以上四种毒素致伤的预保护作用,在心血管芯片模型上,雷公藤甲素预保护后显著降低四种毒素对HUVEC的毒性,有望为深海生物毒素的致伤防护提供新的策略和候选药物。

主权项:1.一种基于心血管芯片模型的深海生物毒素的致伤评价方法,所述的心血管芯片模型由三通道组成,其中一个通道为血管通道,接种脐静脉内皮细胞;中间通道为纤维蛋白原母液和凝血酶母液按一定浓度混合,恒温孵育至纤维蛋白原凝胶化;另一通道为细胞培养液通道;且血管通道进口插入软管,并与蠕动泵相连,参照体内血管流体剪切应力注入细胞培养液以模拟体内血管动态微环境;通过血管通道加入一定浓度的深海生物毒素溶液,观察对细胞的毒性及血管糖萼组织损伤情况,对深海生物毒素的致伤进行评价;对深海生物毒素的致伤评价是在低、中、高浓度梯度下考察深海生物毒素对脐静脉内皮细胞的毒性效应,通过细胞形态观察和CCK-8法评价四种毒素对细胞形态和增殖的影响;所述的心血管芯片模型包括左通道、中间通道、右通道,左通道的液体注入口用于注入脐静脉内皮细胞,中间通道的液体注入口用于注入纤维蛋白原和凝血酶混合液,右通道的液体注入口用于注入细胞培养液;为了便于换液,在左通道和右通道的另一侧对应设置液体出口。

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