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申请/专利权人:中国科学院深圳先进技术研究院
摘要:一种rDNA阵列的快速构建方法及其在人工调控rDNA拷贝数中的应用,属于分子生物学分子技术。本发明提供了一种快速构建rDNA阵列的方法,可以实现在全基因组范围内任一选定位点上构建均一合成型rDNA阵列。在此基础上,本发明还可以将重组酶系统如Cre‑loxP系统引入合成型rDNA阵列的rDNA单元中,介导rDNA单元间的重排,从而实现人工调控rDNA拷贝数的目的。
主权项:1.一种快速构建rDNA阵列的方法,其特征在于,包括以下步骤:1选择任意基因型的酵母菌株作为起始菌株;2构建包含rDNA的A和B片段,其中,片段A依次包含上游同源臂序列、筛选标记基因、串联的1.2拷贝的野生型或合成型rDNA单元;片段B上依次包含一个拷贝的野生型或合成型rDNA单元、下游同源臂序列,同时在A和B片段两端添加多个酶切位点,用于释放完整的片段;3利用限制性内切酶将片段A和片段B从所在质粒载体中完整释放出来;4将包含片段A和片段B的酶切产物以醋酸锂转化法共转化至步骤1的起始菌株中,涂布于筛选标记基因对应的筛选平板上;5筛选出成功整合rDNA阵列的酵母菌株。
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权利要求:
百度查询: 中国科学院深圳先进技术研究院 一种rDNA阵列的快速构建方法及其在人工调控rDNA拷贝数中的应用
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