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申请/专利权人：江南大学
摘要：本发明公开了一组基于酿酒酵母rDNA位点的多拷贝整合质粒工具包，属于基因工程和代谢工程领域。本发明构建了一组可在酿酒酵母中整合表达的多拷贝整合质粒，能够整合至酿酒酵母的26srDNA位点，可以使质粒稳定表达，且通过筛选基因、弱启动子的组合，能够获得较高的荧光强度及拷贝数量。拷贝数量可在15‑20之间，转化子数量可降低至13～42个，降低了筛选的难度并能获得更多的高拷贝的阳性转化子。此外，本申请的工具包也可以简化构建基于rDNA位点的高拷贝整合表达框。
主权项：1.酿酒酵母高拷贝整合表达框，其特征在于，所述整合表达框由rDNA位点的上下游同源臂序列、终止子序列及绿色荧光蛋白表达框及酿酒酵母筛选基因表达框组成；按rDNA位点的上游同源臂、上游终止子序列、绿色荧光蛋白表达框、下游终止子序列、反向的基因表达框、rDNA位点的下游同源臂的顺序连接；所述的酿酒酵母筛选基因表达框由弱启动子序列和带有降解标签deg的筛选基因序列组成；所述弱启动子包括PADE6、PLEU2、PURA3、PPMA1、PZWF1、PARO7、PPYC1、PADE3、PYEF3、PERG1，所述筛选基因包括ScTRP1；将筛选基因ScTRP1的起始密码子替换为AAG；所述上游同源臂的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示；所述下游同源臂的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示；所述筛选基因ScTRP1的核苷酸序列如SEQIDNO.3所示；所述降解标签deg的核苷酸序列如SEQIDNO.5所示。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 江南大学 一组基于酿酒酵母rDNA位点的多拷贝整合质粒工具包
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