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申请/专利权人：大连大学
摘要：本发明属于生物医药领域，具体涉及一种自主构建的SLA‑2‑HB01‑pCDHsT2细胞系筛选CTL表位方法。本发明将外源的SLA‑2‑HB01基因转染到sT2细胞，建立了稳定SLA‑2基因表达模型。经过细胞表面负载EB155等阳性表位肽，通过FACs检测细胞表面表达的SLA‑2‑peptides‑β2m复合体，判定SLA‑2‑HB01‑pCDHsT2具有递呈外源性多肽表位的功能。为了促进细胞表面复合体的形成，添加β2m有助于抗原多肽递呈效率的提高。本发明结果中，As63、EB155和Hu62肽类均能够被SLA‑2‑HB01‑‑pCDHsT2细胞系递呈，其中As63在SLA‑2‑HB01‑pCDHsT2、SLA‑2‑HB01‑Flag‑pCDHsT2和SLA‑2‑HB01‑3×Flag‑pCDH在sT2细胞系中均被递呈且递呈效率基本一致，说明本发明构建的系列表达SLA‑2‑HB01基因的sT2具有递呈抗原的功能，从而可以用以在细胞水平上筛选猪源病毒的多肽表位，也进一步证明了SLA‑2重链分子C‑末端添加Flag标签不会影响细胞系的抗原递呈功能。
主权项：1.一种自主构建的SLA-2-HB01-pCDHsT2细胞系筛选CTL表位方法，其特征是，包括以下步骤：步骤S1：多肽表位合成；其中，多肽序列如下： 步骤S2：PK15、sT2和SLA-2-HB01-pCDHsT2细胞系亲和力实验；步骤S3：筛选肽类条件；步骤S4：CTL表位筛选；步骤S5：激光共聚焦检测。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 大连大学 一种自主构建的SLA-2-HB01-pCDH/sT2细胞系筛选CTL表位方法
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