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申请/专利权人：华南农业大学
摘要：本发明属于分子生物学技术领域，公开了稳定表达NS1蛋白的犬肾细胞系MDCK‑pCDH‑NS1及其构建方法和应用，本发明构建了pCDH‑NS1过表达质粒，通过慢病毒三质粒共转染至人胚胎肾上皮细胞HEK293T中进行慢病毒的包装，收集慢病毒，感染MDCK细胞，利用嘌呤霉素筛选方法成功获得稳定表达细胞系经嘌呤霉素培养液筛选进而建立了稳定表达NS1蛋白的MDCK‑pCDH‑NS1细胞系，为筛选参与特定功能的未知蛋白提供参考。
主权项：1.稳定表达NS1蛋白的犬肾细胞系MDCK-pCDH-NS1的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、构建pCDH-NS1过表达载体：将目的基因NS1连接至pCDH-CMV-MCS-EF1-CopGFP-T2A-Puro载体上，得到重组质粒pCDH-NS1；S2、慢病毒包装：将重组质粒pCDH-NS1和PsPaX2、PMD2.G三质粒共转染至人胚胎肾上皮细胞HEK293T中进行慢病毒包装；S3、稳定表达细胞系的构建：将S2包装后的慢病毒感染MDCK细胞，利用嘌呤霉素筛选方法获得稳定表达NS1蛋白的犬肾细胞系MDCK-pCDH-NS1。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 华南农业大学 稳定表达NS1蛋白的犬肾细胞系MDCK-pCDH-NS1及其构建方法和应用
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