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申请/专利权人：深圳市海伦海生物科技有限公司
摘要：本发明涉及细胞基因工程领域，具体公开了一种ARHGAP11B基因缺失的iPSC细胞系的构建方法及应用。本发明用于靶向敲除人ARHGAP11B基因的特异性sgRNA在人ARHGAP11B基因的靶向位点位于人ARHGAP11B基因的6号外显子上。本发明提供的特异性sgRNA能够高效靶向人ARHGAP11B基因，并且基于CRISPRCas9系统构建敲除iPSC细胞系中ARHGAP11B基因的方法，该方法操作简便，敲除效果更加彻底。
主权项：1.一种基于CRISPRCas9系统敲除iPSC细胞系中ARHGAP11B基因的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、将CRISPRCas9载体转染iPSC，培养，通过嘌呤霉素筛选成功转染的阳性iPSC；S2、对成功转染的阳性iPSC进行多能性鉴定；所述CRISPRCas9载体包括靶向敲除人ARHGAP11B基因的特异性sgRNA、抗性基因Puro和GFP荧光蛋白基因；所述sgRNA在人ARHGAP11B基因的靶向位点位于人ARHGAP11B基因的6号外显子上；所述sgRNA对应的核苷酸序列为：asgRNA1：gcgtgtaccagactttatcc；和，bsgRNA2：ggaaaagataccagccatgt；和，csgRNA3：gactttatcctggaaaagat。
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权利要求：
百度查询： 深圳市海伦海生物科技有限公司 一种ARHGAP11B基因缺失的iPSC细胞系的构建方法及应用
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