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A3Z2基因敲除的ST细胞株及其构建方法和用途 

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申请/专利权人:广东省农业科学院动物卫生研究所;兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心

摘要:本发明属于生物技术领域,公开了一种A3Z2基因敲除的ST细胞株的构建方法,采用慢病毒感染ST细胞株,经筛选得到A3Z2基因敲除的ST细胞株;所述ST细胞株为能表达Cas9蛋白的ST细胞株;所述慢病毒为用于敲除ST细胞株的A3Z2基因的慢病毒。流式细胞术分析发现,与ST细胞株(ST‑WT)相比,敲除A3Z2基因的ST细胞株(ST‑A3Z2‑KO),处于G1期的细胞数量明显增多;当PDCoV感染ST‑A3Z2‑KO细胞后,该细胞株中处于G1期的细胞数量明显减少;由此可见,PDCoV可以利用细胞G1期的有利条件进行高效增殖。因此,该发现不仅仅可以应用于PDCoV的增殖,对于其他病毒的增殖也是有着积极意义的。同时,本发明还提供细胞系的构建方法以及用途。

主权项:1.一种阻滞ST细胞株的细胞周期在G1期的方法,其特征在于,所述方法为:敲除ST细胞株的A3Z2基因;敲除ST细胞株的A3Z2基因的方法为:采用慢病毒感染ST细胞株,经筛选得到A3Z2基因敲除的ST细胞株;所述ST细胞株为能表达Cas9蛋白的ST细胞株;所述慢病毒携带包含双sgRNA的片段,所述包含双sgRNA的片段的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。

全文数据:

权利要求:

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