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申请/专利权人：诺沃挪第克公司
申请日：1994-06-22
公开（公告）日：2001-03-21
公开（公告）号：CN1063488C
专利技术分类：..分离、制备或纯化DNA或RNA的方法（DNA或RNA的化学制备入C07H21/00；自微生物中或用酶制备非结构多核苷酸入C12P19/34）[2006.01]
专利摘要：本发明公开了一种在体内扩增亲本细胞基因组中ＤＮＡ序列Ｂ的方法。$＃!
专利权项：1．一种在体内扩增亲本细胞基因组中DNA序列B的方法，包括：a将含有C-M-A-D结构的DNA构建体整合到所说的细胞的基因组中，其中，A表示与侧接或交叠待扩增DNA序列B的基因组DNA片段同源的DNA序列，或者是与作为DNA序列B构成的所说序列B的末端之一的基因组DNA片段同源的DNA序列；C表示与侧接或交叠待扩增DNA序列B的基因组DNA片段同源的DNA序列，或者是与作为DNA序列B构成的所说序列B的末端之一的基因组DNA片段同源的DNA序列，与序列A相比，序列C定位于序列B的相对的末端；D表示与序列B相比定位于序列C远端的基因组DNA片段同源的DNA序列；M表示编码选择标志的DNA序列，b选择其中有DNA序列M与序列A一起整合至DNA序列B的上游或下游的基因组中的细胞，该细胞含有任意方向的A-B-C-M-A-D的结构，c在增加对于由DNA序列M编码的选择标记的选择压力下增殖步骤b中选择的细胞，得到与亲本细胞相比增加了DNA序列B和M的基因组整合拷贝数的细胞。
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