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植物乳杆菌ZJUF T17及其应用 

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申请/专利权人:浙江大学;浙江全植生物科技有限公司

摘要:本发明公开了一种植物乳杆菌Lactobacillus plantarumZJUF T17及其应用,属于生物技术领域。植物乳杆菌ZJUF T17分离自酸面团,保藏号为CCTCC NO:M 2017342。本发明提供的植物乳杆菌ZJUF T17在胃肠道中具有很高的生存率、较强的胃肠粘附力,能显著抑制胃、肠道致病菌的繁殖;该植物乳杆菌能够显著降低血清中胆固醇含量,优化高密度脂蛋白胆固醇与低密度脂蛋白胆固醇的比例;该植物乳杆菌能够显著降低血清中的TNF‑α含量,具有免疫调节的功能;该植物乳杆菌具有缓解体重增加的能力;此外,该植物乳杆菌具有制备发酵乳的潜力。

主权项:1.一种植物乳杆菌ZJUF T17Lactobacillus plantarum ZJUF T17,该植物乳杆菌的保藏号为CCTCC NO:M 2017342。

全文数据:植物乳杆菌ZJUFT17及其应用技术领域[0001]本发明涉及生物技术领域,具体涉及植物乳杆菌Lactobacillusplantarum的一个新菌株ZJUFTl7及其应用。背景技术[0002]传统发酵食品中含有丰富的乳酸菌,所述乳酸菌在人体的消化系统中共生,起到通过分解纤维质及复合蛋白质来制备重要的营养成分的作用。这种存活于包括人在内的动物的胃肠器官内,改善宿主的肠道微生物环境,从而对宿主的健康有利的微生物统称为益生菌。近年来,随着人们的健康意识的增加,促进了益生菌研究的发展。现已证明益生菌具有调节胃肠道菌群、调节免疫、抗氧化、降胆固醇等作用,且益生菌发酵生产的食品也具有相似的功會泛[Gerritsen,J.,etal.,Intestinalmicrobiotainhumanhealthanddisease:theimpactofprobiotics.GenesandNutrition,2011.63:ρ·209-240·]〇[0003]为了使益生菌具有效果,需要经口摄取到达小肠,附着于肠表面并维持这种附着状态,而胃肠道内的低PH值、胆盐、蛋白酶的影响会导致活菌数的下降,因此至少需要具有优异的耐酸性、耐胆盐性,以及附着于肠上皮细胞上的附着力。[0004]植物乳杆菌作为益生菌的一种,广泛存在于传统的发酵食品(发酵果蔬、发酵肉制品、发酵乳制品)、胃肠道和阴道中。不同菌株之间的功能有差异,且应用范围也有不同。已在预防胃肠道菌群失调及腹泻、降胆固醇、缓解过敏、缓解IBD和IBS等方面进行了广泛研究[deVries,M.C.,etal.,Lactobacilluspiantarum-survival,functionalandpotentialprobioticpropertiesinthehumanintestinaltract.InternationalDairyJournal,2006.169:p.1018-1028.]〇[0005]传统的乳制品主要由保加利亚乳杆菌、嗜热链球菌制作而成,近年来,也有使用发酵乳杆菌、干酪乳杆菌和副干酪乳杆菌进行发酵乳的制备。植物乳杆菌制备发酵乳也有见报道,但是其发酵能力仍略低于LactobacilluscaseiShirota等[Angmo,K.,etal·,ProbioticcharacterizationoflacticacidbacteriaisolatedfromfermentedfoodsandbeverageofLadakh.Lwt-FoodScienceandTechnology,2016.66:p.428-435.],开发植物乳杆菌的发酵乳的能力具有一定前景。发明内容[0006]本发明的目的在于提供一种植物乳杆菌LactobacillusplantarumZJUFT17,该植物乳杆菌具有优异的益生作用、调节胆固醇和免疫的功能以及具备制备发酵乳的潜力。[0007]本发明从酸面团中分离筛选得到一菌株T17,经16SrRNA基因比对,鉴定该菌株为植物乳杆菌,命名为植物乳杆菌ZJUFT17LactobacillusplantarumZJUFT17。植物乳杆菌ZJUFT17的16SrRNA的碱基序列如SEQIDNO.1所示。将植物乳杆菌ZJUFT17于2017年6月16日保藏于中国典型培养物保藏中心地址:中国武汉,武汉大学),保藏号为:CCTCCNO:M2017342。[0008]体外实验证明,植物乳杆菌ZJUFT17具有耐受胃肠道转运液的能力,在模拟人工胃肠道中具有很高的生存率;植物乳杆菌ZJUFT17自凝率达到了98.10%,具备较强的胃肠粘附力;与肠道致病菌4h的交互凝集率均在35%以上,其在肠道中与致病菌凝集,并顺利排出体外,有利于肠道健康;植物乳杆菌ZJUFT17能够显著抑制胃肠道致病菌的繁殖,如大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、李斯特菌。因此,植物乳杆菌ZJUFT17可用于预防或治疗胃肠道菌群失衡。[0009]本发明的另一个目的是提供一种植物乳杆菌ZJUFT17在制备抑制胃肠道致病菌的药物或食品中的应用。[0010]本发明的另一个目的是提供一种植物乳杆菌ZJUFT17在制备降低动物或人体内胆固醇浓度的药物或食品中的应用。所述的植物乳杆菌ZJUFT17具有降低胆固醇的功能,能显著降低小鼠血清中的总胆固醇含量,提高高密度脂蛋白胆固醇与低密度脂蛋白胆固醇的比值。[0011]本发明的另一个目的是提供一种植物乳杆菌ZJUFT17在制备免疫调节药物或保健食品中的应用。所述的植物乳杆菌ZJUFT17能提高血清中的IL-10含量以及显著降低的TNF-α含量,机体内过量的TNF-α,与其他炎症因子一起促进多种病理性损伤和引起代谢紊乱,其中,破坏胰岛素信号转导,产生胰岛素抵抗。IL-10主要由树突细胞和巨噬细胞分泌的抗炎细胞因子,可以抑制诱导慢性炎症的预炎细胞因子的产生。对IL-10的抑制会增加炎症因子如TNF-a和IL-6的表达。因此,植物乳杆菌ZJUFT17具有免疫调节的功能。[0012]据报道,人的一些慢性代谢疾病肥胖、糖尿病与免疫细胞产生IL-10能力不足有关[IdentificationofaLactobacillusplantarumstrainthatameliorateschronicinflammationandmetabolicdisordersinobeseandtype2diabeticmice]〇[0013]本发明的另一个目的是提供一种植物乳杆菌ZJUFT17在制备预防或治疗慢性疾病的药物或保健食品中的应用。[0014]作为优选,所述的慢性疾病为肥胖症或糖尿病。[0015]本发明研究表明,植物乳杆菌ZJUFT17能够降低高脂膳食带来的体重增加,优化胆固醇组成,而且能够降低高脂膳食肥胖带来的氧化应激损伤。[0016]优选地,上述的药物的给药方式为经口给药,具体给药量根据疾病种类、疾病程度、年龄及给药目的进行调节。[0017]本发明的另一个目的是提供一种植物乳杆菌ZJUFT17在生产发酵乳制品中的应用。所述的植物乳杆菌ZJUFT17具有发酵乳的潜力,24h发酵过程中,可以降低pH值到4.2;增加TTA值到110,发酵乳中的蛋白水解得到的丝氨酸含量可达到18.87mgmL;发酵过程和4°C保存过程中能保持较高活菌率。[0018]优选地,植物乳杆菌ZJUFT17按照1.5-2XIO7CfVmL添加到经灭菌处理的脱脂乳培养基(脱脂乳11.5%,葡萄糖0.75%,鹿糖5%八)中,37°:条件下发酵2411。[0019]本发明具备的有益效果:[0020]本发明提供的植物乳杆菌ZJUFT17在胃肠道中具有很高的生存率、较强的胃肠粘附力,能显著抑制胃、肠道致病菌的繁殖;该植物乳杆菌能够显著降低血清中胆固醇含量,优化高密度脂蛋白胆固醇与低密度脂蛋白胆固醇的比例;该植物乳杆菌能够显著降低血清中的TNF-α含量,具有免疫调节的功能;该植物乳杆菌具有缓解体重增加的潜力;此外,该植物乳杆菌具有制备发酵乳的潜力。附图说明[0021]图1为LactobacillusplantarumZJUFT17在模拟胃肠液中的转运耐受,其中㈧:人工胃液,⑻:人工肠液。[0022]图2为LactobaciIluspIantarumZJUFTl7自凝集特性。[0023]图3为3个实验组小鼠在饲喂高脂膳食10周过程中体重情况。[0024]图4为3个实验组小鼠在饲喂高脂膳食第10周时的体重情况,图中*表示与N⑶组进行显著性分析,#表示与HFD组进行显著性分析;****代表p〈0.0001,##代表p〈0.01。[0025]图5为3个实验组小鼠在饲喂高脂膳食10周后血清中血脂参数变化,其中(A为总胆固醇T-CHO、⑻为高密度脂蛋白胆固醇HDL-C、⑹为低密度脂蛋白胆固醇LDL-C、⑼为HDL-CLDL-C的比例,图中*表示与NCD组进行显著性分析,#表示与ΗΠ组进行显著性分析;##代表p〈0·0001,*#代表p〈0·001,#代表p〈0·01,####代表p〈0·0001,##代表p〈O-Ol0[0026]图6为3个实验组小鼠在饲喂高脂膳食10周后血清中炎症因子的变化情况,其中A为IL-10,⑻为IL-Ιβ、⑹为IL-6,⑼为TNF-α含量,图中*表示与NCD组进行显著性分析,#表示与HFD组进行显著性分析;**代表p〈0·01,###代表p〈0·001,##代表p〈0·01。[0027]图7为3个实验组小鼠在饲喂高脂膳食10周后血清中氧化应激因子的变化情况,其中㈧为T-A0C、⑻为GHS-Px、(C为T-S0D、⑼为MDA,图中*表示与NCD组进行显著性分析,#表示与ΗΠ组进行显著性分析;##代表p〈0·0001,#代表p〈0·01,####代表p〈0·0001,##代表ρ〈0·01。[0028]图8为LactobacillusplantarumZJUFΤ17发酵乳过程中pH变化,其中A为24h内的pH变化情况,⑻为2周内的pH变化情况。[0029]图9为LactobacillusplantarumZJUFT17发酵乳过程中TTA变化,其中(A为24h内的TTA变化情况,(B为2周内的TTA变化情况。[0030]图10为LactobacillusplantarumZJUFT17发酵蛋白水解能力分析,其中(A为24h内的丝氨酸浓度变化情况,(B为2周内的丝氨酸浓度变化情况。具体实施方式[0031]下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。[0032]实施例1[0033]1、菌株的筛选及分离[0034]称取5g酸面团加入到45mL0.85%的灭菌生理盐水中,振荡制成悬液,进行系列梯度稀释,稀释后取HT5、1〇_6、HT7三个梯度涂布于MRS培养基上,每个梯度做三个平行。将涂布后的平板放入37°C厌氧培养箱中培养24-48h。挑选差异明显的菌落进行MRS培养基上划线分离,将平板放入37°C厌氧培养箱中培养24-48h。连续划线3-5次后,取一滴现配的5%的过氧化氢滴于载玻片上,挑取固体培养基上单菌落接入5%的过氧化氢液滴中并混匀,产生气泡为过氧化氢酶试验阳性,未产生气泡为过氧化氢酶试验阴性,过氧化氢酶试验阴性菌株为疑似益生菌株。[0035]将筛选得到的疑似益生菌株分别以1%接种量接入MRS-THIO液体培养基MRS中添加0.2%的巯基乙酸钠和含0.3%wv的猪胆盐的MRS-THIO培养基中上述处理放置在37°C厌氧培养箱中培养24h,取样在620nm下测定吸光值,计算24h的OD值差值,检测菌株的生长能力。[0036]将上述筛选得到的疑似益生菌株以1%接种量接种到pH3.0的MRS培养基中,37°C厌氧培养箱中培养24h,取样在600nm下测定吸光值,计算24h的OD值差值,检测菌株的生长能力,筛选得到了T17。[0037]2、菌株的鉴定[0038]将T17进行革兰氏染色,并进行了16SrRNA基因菌种鉴定,此鉴定送样上海派森诺生物有限公司进行,经过16SrRNA基因比对,T17为一株植物乳杆菌,命名为植物乳杆菌ZJUFT17LactobacillusplantarumZJUFT17。植物乳杆菌ZJUFT17的16SrRNA的碱基序列如SEQIDNO.1所示。[0039]将植物乳杆菌ZJUFT17于2017年6月16日保藏于中国典型培养物保藏中心地址:中国武汉,武汉大学),保藏号为:CCTCCΝ0:Μ2017342。[0040]3、模拟人工胃肠液耐受性[0041]人工胃液:NaCl0.2g100mL,胃蛋白酶p印sin0.35g100mL,用lmolLHCl调整口!1为2.0,2.5,3.0,4.0,过滤除菌备用0.224111膜)。[0042]人工肠液:NaHCCb1·lg100mL,NaCl0·2g100mL,膜蛋白酶(trypsin0·IgIOOmL,猪胆盐I·8g1OOmL,调整pH值为8·0,过滤除菌备用。[0043]取0.5mL的供试菌液加入到4.5mL的人工胃液中,震荡IOs后放入37°C厌氧培养,在处理011、111、211、311取样,测活菌数1:^1¥丨13163〇1111七8。[0044]取0.5mL的上述3h人工胃液反应液加入到4.5mL的人工肠液中,震荡IOs后放入37°〇厌氧培养,在处理011、311、811、2411取样,测活菌数1:〇丨31¥丨31316〇〇111^8。[0045][0046]No:处理前的活菌数;[0047]N1:用PBS或人工胃肠液处理过的活菌数。[0048]结果如图1所不,LactobacillusplantarumZJUFT17耐受ρΗ4·0和3.0胃肠液转运的能力较好,转运结束后存活率高于77%;ρΗ2.5的胃液可显著降低菌株Τ17的存活率,3h胃液处理后存活率为77.8%,后经肠液消化后存活率下降至55.9%。[0049]4、最高胆盐浓度耐受性实验[0050]配制含不同胆盐浓度(0·3%、0·4%、0·6%、0·8%、1·0%、1·2%、1·4%、1·6%、1.8%的MRS液体培养基,以不加胆盐的培养基作为对照,按1%的接种量接入培养基中,37°C厌氧培养24h,在Oh和12h时测定620nm下测定吸光值,计算差值。培养基调整pH值为7.0〇[0051]OD值差值0说明在此胆盐浓度下LactobacillusplantarumZJUFT17可以生长,如表1所示,LactobacillusplantarumZJUFT17浸在0.3%和0.4%的胆盐中可以生长。[0052]表ILactobacillusplantarumZJUFT17在24h对不同胆盐耐受情况[0054]5、黏附能力测定凝集特性)[0055]取108cfumL的菌悬液4ml加入无菌离心管中,在4、8、18、24h静置状态下取上层清液150uL加入到96孔板中,测定0D600nm值。[0056][0057]Ao:Oh时样品的OD值;[0058]At:不同时间段样品的㈤值。[0059]相同体积500uL的益生菌和病原菌混合,放置在室温下(勿摇动),在4h静置状态下取上层清液150uL加入到96孔板中,测定㈤600nm值。[0060][0061]Apat:病原菌Oh时OD值;[0062]Aprobio:益生菌Oh时OD值;[0063]Amix:不同时间段的㈤值。[0064]如图2所示,植物乳杆菌ZJUFTl7的自凝集率8h时已达到60%,18h后超过90%,说明此植物乳杆菌ZJUFT17的自凝集作用很好,具有较好的肠道黏附的潜力。[0065]与肠道致病菌之间的交互凝集作用结果如下表2所示,对金黄色葡萄球菌交互凝集率最高,达到60%,其次是大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌,对单增李斯特菌的交互凝集作用最弱。此植物乳杆菌ZJUFT17的交互凝集作用能使其在肠道中与致病菌较好的凝集,并顺利排出体外,有利于肠道健康。[0066]表2LactobacillusplantarumZJUFT17与不同病原菌交互凝集率[0068]6、抑菌特性研究[0069]使用琼脂孔扩散法Well-diffiisionAgarAssay测定菌株的抑菌能力。取20mL灭菌冷却45°C的TSA培养基与200uL致病菌液(l-2*107cfumL—起倒入平板混匀,待凝固后于平板上打孔,孔径为7mm。将已制备好的无菌上清液将培养好的菌液离心,取上清液用0.22um的微孔滤膜过滤除菌,置于-80°C备用UOOuL分别加入孔中,以等体积已灭菌的PBS为对照,置于4°C下扩散12h,取出放入37°C培养24h。测量其抑菌圈直径。[0070]如表3所示,LactobacillusplantarumZJUFT17对大肠杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和李斯特菌4种常见致病菌具有一定的抑制能力,其中对鼠伤寒沙门氏菌的抑制能力最强,对2株革兰氏阳性菌的抑菌圈直径在17-18mm左右,对大肠杆菌的抑制能力最差,抑菌圈至今只有15.5mm。[0071]表3LactobacillusplantarumZJUFT17抑制致病菌能力[0074]7、菌株ZJUFT17对正常膳食小鼠的影响[0075]选取4周龄、体重相近的健康雄性C57BL6小鼠(SPF为实验对象,预饲喂1周后,随机分为2个实验组,每个实验组3笼,每笼3只小鼠,进行6周的饲喂实验。[0076]对照组:饲喂普通饲料,每天灌胃200uL生理盐水;[0077]ZJUFT17组:饲喂普通饲料,每天灌胃200uL含有5*108cfu活菌)。[0078]记录初始和结束体重,饲喂6周后处死眼眶取血,使用南京建成试剂盒进行血清中总胆固醇T-CHO、高密度脂蛋白胆固醇HDL-C和低密度脂蛋白胆固醇LDL-C含量测定;使用eBioscience试剂盒进行血清中IL-10和TNF-α含量测定。[0079]7.1菌株ZJUFT17灌胃小鼠降低血液胆固醇含量[0080]结果如下表4所不,LactobacillusplantarumZJUFT17饲喂小鼠6周后,血清中总胆固醇含量为3.34mm〇IL,对照组的含量为3.72mm〇IL。结果说明小鼠摄入6周LactobacillusplantarumZJUFT17有降低血清中胆固醇含量的趋势。对于LDL-C和HDL-C来说,LactobacillusplantarumZJUFT17的摄入均比对照组显著降低。因LDL-C和HDL-C两者在ZJUFT17组的含量均降低,进行HDL-CLDL-C比值的分析,结果显示,ZJUFT17组的HDL-CLDL-C的比值显著高于对照组。[0081]表4LactobacillusplantarumZJUFT17饲喂小鼠6周血清胆固醇参数[0083]7.2菌株ZJUFT17灌胃小鼠调节免疫[0084]结果如下表5所不,LactobacillusplantarumZJUFT17饲喂小鼠6周后,血清中抗炎因子IL-10含量为61.85pgmL,对照组的含量为52.14pgmL,含量有所上升但没有显著性差异。血清中TNF-α含量为39.01pgmL,对照组含量为57.91pgmL,摄入菌株ZJUFT17后,小鼠血清中预炎因子TNF-a的含量有显著下降。菌株LactobacillusplantarumZJUFT17的摄入,对IL-10和TNF-α的调节说明其具有调节免疫的功能。[0085]表5LactobacillusplantarumZJUFT17饲喂小鼠6周血清细胞因子参数[0087]8、植物乳杆菌ZJUFT17对高脂膳食小鼠的影响[0088]选取4周龄、体重相近的健康雄性C57BL6小鼠(SPF为实验对象,预饲喂1周后,随机分为3个实验组,每个实验组5笼,每笼3只小鼠,进行10周的饲喂实验。[0089]对照组NCD:饲喂普通饲料,每天灌胃200uL生理盐水;[0090]高脂组HFD:饲喂45%的高脂饲料,每天灌胃200uL生理盐水;[0091]ZJUFT17组(HFD-T17:饲喂45%的高脂饲料,每天灌胃200汕(含有5*10\作活菌。[0092]记录初始和结束体重,结束时,眼眶取血,使用南京建成试剂盒测定血清中总胆固醇(T-CHO、高密度脂蛋白胆固醇HDL-C、低密度脂蛋白胆固醇LDL-C、谷胱甘肽过氧化物酶®SH-Px、总超氧化物歧化酶T-SOD和丙二醛MDA含量,使用eBioscience试剂盒细胞因子IL-6、IL-10和TNF-α,使用碧云天试剂盒测定血清中总抗氧化能力T-AOC。[0093]8.1体重变化[0094]饲喂10周后,3组小鼠的体重增重变化以及第10周的体重增重如图3所示,普通膳食(NCD从第1周开始体重增重就显著低于高脂膳食组。饲喂前6周时,植物乳杆菌ZJUFT17缓解体重增加效果并不明显,从第7周开始,开始出现差异,8周后,与高脂组HFD间有显著性差异。[0095]第10周的增重结果见图4,饲喂高脂膳食的小鼠体重均极显著高于普通膳食小鼠,而摄入植物乳杆菌ZJUFT17后,饲喂高脂膳食的小鼠增重显著低于Hro组p=0.0091,显示了植物乳杆菌ZJUFT17缓解高脂膳食带来的体重的增加。[0096]8.2对血清胆固醇的调节[0097]高脂膳食的摄入,会带来胆固醇含量的增加,以及增加心血管疾病发生的风险,植物乳杆菌ZJUFT17的摄入,对血清中胆固醇进行了调节,结果见图5所示。总体上讲,高脂膳食(HFD显著增加了总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的含量,相应显著降低了HDL-CLDL-C的比例,增加了心血管疾病发生的风险;饲喂高脂膳食,并摄入植物乳杆菌ZJUFT17后,能有效的缓解这一现象,能显著降低高脂膳食带来的总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇的增加,相应地显著增加了HDL-CLDL-C的比例,此比例与NCD组间也没有显著性差异。[0098]与高脂膳食相比,摄入植物乳杆菌ZJUFT17后,血清中总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇含量分别下降了25.21%和29.41%,而高密度脂蛋白胆固醇含量上升了13.6%。植物乳杆菌ZJUFT17对高脂膳食胆固醇的调节主要体现在降低低密度脂蛋白胆固醇含量上,从而优化胆固醇的组成。[0099]8.3对血清炎症因子的影响[0100]肥胖是一种慢性炎症疾病,体重的过度增加,会带来一定的炎症因子的改变,结果如图6所示。IL-10和TNF-α的变化与普通膳食小鼠的规律一致。高脂膳食HFD的饲喂能显著增加小鼠血清中预炎因子(IL-6和TNF-α,摄入植物乳杆菌ZJUFT17后HFD-T17,能缓解高脂膳食带来的预炎因子含量的增加。[0101]与高脂膳食相比,摄入植物乳杆菌ZJUFT17后,血清中抗炎因子IL-10含量增加了29.51%,预炎因子11^-10、11^-6和了册-€[含量分别降低了42.49%、7.1%和52.85%。植物乳杆菌ZJUFT17对高脂膳食中免疫因子的调节,总体上能降低预炎因子含量,增加抗炎因子含量,其中对IL-Ιβ和TNF-a含量的调节具有显著性差异,而且从含量上能降低40-50%,具有优越的性能。[0102]8.4对血清氧化应激的影响[0103]对饲喂10周小鼠血清中氧化应激指标进行测定,结果如图7所示。高脂膳食HFD小鼠的抗氧化能力均显著低于普通膳食小鼠(T-A0C、GHS-Px和T-S0D,而过氧化物MDA的含量要高于普通膳食小鼠。摄入植物乳杆菌ZJUFT17后,能显著缓解高脂膳食带来的不利影响。[0104]与高脂膳食相比,摄入植物乳杆菌ZJUFT17后,血清中T-AOC含量升高了8.2%,GHS-Px含量升高了7.83%,T-SOD含量升高了28.89%,而MDA含量下降了35.32%JDA常与T-SOD测定结合,T-SOD活力间接反映了机体清除氧自由基的能力,而MDA又间接反映机体细胞受自由基攻击的严重程度。植物乳杆菌ZJUFT17能显著大幅度改变T-SOD和MDA的含量,具有一定的降低高脂膳食肥胖带来的氧化应激损伤的能力。[0105]9、LactobacillusplantarumZJUFT17发酵乳能力[0106]活化后的T17和LGG鼠李糖乳杆菌,对照菌株调整菌浓度并用生理盐水进行清洗2次,加入到200mL的脱脂乳培养基脱脂乳11.5%,葡萄糖0.75%,蔗糖5%wv中,使最终菌浓度为1.5-2*107cfumL脱脂乳,每种处理做3个平行,放置在37°C中培养,并于0、6、12、18、24h取样测定发酵指标;随后放置在4°C冰箱中,于1周、2周后取样测定。[0107]如图8所不,LactobacillusplantarumZJUFT17发酵乳过程中,使pH从6.6降低至IJ4.2左右,且在保存过程中一直维持4.2左右。与阳性对照菌株LGG相比,LactobaciIIusplantarumZJUFT17在前6h使降低pH相对较快,随后,与LGG降低速率相似,最后均维持在4.2左右。[0108]如图9所示,发酵乳过程中TTA从17增加到110。发酵前UMtLactobacillusplantarumZJUFTl7与阳性对照菌株LGG增加TTA速率相似,但12-18h时,LactobaciIlusplantarumZJUFT17增加TTA的速率显著高于LGG,直到保存14天后,LactobacillusplantarumZJUFT17发酵乳的TTA值仍高于LGG。[0109]如图10所示,从整个发酵周期及保存周期来看,除发酵24h时,LactobacillusplantarumZJUFT17分解得到的丝氨酸含量均显著高于LGGp〈0.05,保存14天仍有所增力口,最终达到22mmolL。[0110]表6LactobacillusplantarumZJUFT17发酵乳菌落分析[0112]如表6所示,37°C发酵24h结束时,LactobacillusplantarumZJUFT17活菌数低于LGG,但两者之间没有显著性差异。在后期4°C保存中,两种菌的活菌都有所下降,LactobacillusplantarumZJUFT17活菌数显著低于LGG,说明LactobacillusplantarumZJUFT17发酵过程中活菌数较高,但4°C保存时活菌数下降较快。

权利要求:1.一种植物乳杆菌ZJUFT17LactobacillusplantarumZJUFT17,该植物乳杆菌的保藏号为CCTCCN0:M2017342。2.如权利要求1所述的植物乳杆菌ZJUFT17在制备抑制胃肠道致病菌的药物或食品中的应用。3.如权利要求1所述的植物乳杆菌ZJUFT17在制备降低动物或人体内胆固醇浓度的药物或食品中的应用。4.如权利要求1所述的植物乳杆菌ZJUFT17在制备免疫调节药物或保健食品中的应用。5.如权利要求1所述的植物乳杆菌ZJUFT17在制备预防或治疗慢性疾病的药物或保健食品中的应用。6.如权利要求5所述的应用,所述慢性疾病为肥胖症或糖尿病。7.如权利要求1所述的植物乳杆菌ZJUFT17在生产发酵乳制品中的应用。

百度查询: 浙江大学 浙江全植生物科技有限公司 植物乳杆菌ZJUF T17及其应用

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