恭喜中国水产科学研究院长江水产研究所彭婕获国家专利权
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龙图腾网恭喜中国水产科学研究院长江水产研究所申请的专利一种快速鉴定扑草净在克氏原螯虾不同组织中代谢产物的方法获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN116046925B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-21发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211542676.4,技术领域涉及:G01N30/02;该发明授权一种快速鉴定扑草净在克氏原螯虾不同组织中代谢产物的方法是由彭婕;甘金华;喻亚丽;毛涛;张浪;张涛;刘婷设计研发完成,并于2022-12-02向国家知识产权局提交的专利申请。
本一种快速鉴定扑草净在克氏原螯虾不同组织中代谢产物的方法在说明书摘要公布了:本发明公开了一种快速鉴定扑草净在克氏原螯虾不同组织中代谢产物的方法,该方法包括如下步骤:S1、扑草净药浴给药;S2、样品前处理:采用的提取溶剂为乙腈,采用的净化剂为EMR‑Lipid和CleanertLipoNo的混合物;S3、不同组织的代谢产物检测和定性分析。该方法简单,操作便捷,前处理方法适用于克氏原螯虾多种不同组织血淋巴、肌肉、肝胰腺、鳃等,而且鉴定分析速度快,能获得扑草净及其代谢产物的精确质量、保留时间等信息,确保了扑草净及其代谢产物鉴定结果的准确性。
本发明授权一种快速鉴定扑草净在克氏原螯虾不同组织中代谢产物的方法在权利要求书中公布了:1.一种快速鉴定扑草净在克氏原螯虾不同组织中代谢产物的方法,其特征在于包括如下步骤:S1、扑草净药浴给药:取克氏原螯虾雌虾和雄虾鲜活样本,分别置于扑草净药液进行药浴,在药浴过程中,在不同时间点分别采集克氏原螯虾雌虾和雄虾的不同组织,除血液直接冷冻保存外,将采集的每个组织均质后冷冻保存,得到克氏原螯虾雌虾和雄虾在不同时间点下的不同组织样本;S2、样品前处理:准确称取组织样本,加入乙腈后混匀,接着加入氯化钠和无水硫酸镁除水,离心后取上清液,将上清液旋蒸至近干,将所得的残余物用复溶溶剂溶解,得到复溶液,向复溶液加入净化剂,混匀后离心,将所得的上清液过滤,取滤液即为待测样品;所述的净化剂为EMR-Lipid和CleanertLipoNo的混合物,EMR-Lipid和CleanertLipoNo的质量比为2-4:1;将步骤S1获得每个组织样本都按照上述的方法进行处理,获得克氏原螯虾雌虾和雄虾在不同时间点下不同组织的待测样品;S3、不同组织的代谢产物检测和定性分析:采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱对空白对照样品和每个待测样品进行检测,四级杆飞行时间质谱的检测条件如下:离子源为电喷雾源,正离子模式扫描,全离子扫描测定,电喷雾电压5500V,雾化气流量和辅助气流量均为55Lh,气帘气流速35Lh,离子源温度550℃;TOF-MS扫描范围mz100-1000,去簇电压65V,碰撞能量10V,离子累积加速时间0.25s;IDA-MSMS扫描范围mz50-1000,去簇电压65V,碰撞能量35±15V,离子累积加速时间0.06s;将待测样品的总提取离子流图与空白对照样品的总提取离子流图进行对比,扣除两者存在的相同色谱峰,剩余物质即为差异目标物,差异目标物为扑草净及其代谢产物一、代谢产物二、代谢产物三和代谢产物四;分析差异目标物的高分辨质谱信息,以及对扑草净的结构分析和代谢路径推测,初步判定代谢产物一为去异丙基扑草净,代谢产物二为扑草净亚砜,代谢产物三为扑草净亚砜异构体,代谢产物四为扑草净亚砜异构体氧化物;将代谢产物一与去异丙基扑草净标准品的保留时间、准分子离子及同位素丰度比、二级碎片离子进行比对,确定代谢产物一为去异丙基扑草净;将代谢产物二与扑草净亚砜标准品的保留时间、准分子离子及同位素丰度比、二级碎片离子进行比对,确定代谢产物二为扑草净亚砜;根据扑草净相关代谢产物特定结构片段中的共性和产物离子裂解规律,结合软件拟合提供的化合物及其碎片离子分子式相关信息,鉴定代谢产物三为扑草净亚砜异构体,代谢产物四为扑草净亚砜异构体氧化物;通过对克氏原螯虾雌虾和雄虾不同组织的待测样品进行定性分析发现,克氏原螯虾雌虾和雄虾不同组织中扑草净的代谢产物相同,代谢产物均为去异丙基扑草净、扑草净亚砜、扑草净亚砜异构体和扑草净亚砜异构体氧化物。
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