恭喜中国人民解放军海军军医大学陈费获国家专利权
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龙图腾网恭喜中国人民解放军海军军医大学申请的专利诱导胆囊源干细胞分化为功能性肝实质细胞的方法与应用获国家发明授权专利权,本发明授权专利权由国家知识产权局授予,授权公告号为:CN115558632B 。
龙图腾网通过国家知识产权局官网在2025-03-14发布的发明授权授权公告中获悉:该发明授权的专利申请号/专利号为:202211258248.9,技术领域涉及:C12N5/071;该发明授权诱导胆囊源干细胞分化为功能性肝实质细胞的方法与应用是由陈费;王敏君;金宜强;徐守佳设计研发完成,并于2022-10-14向国家知识产权局提交的专利申请。
本诱导胆囊源干细胞分化为功能性肝实质细胞的方法与应用在说明书摘要公布了:本发明涉及生物技术和细胞治疗领域,公开了诱导胆囊源干细胞分化为功能性肝实质细胞的方法与应用;包括步骤:在第一培养基、第二培养基、第三培养基的存在下,在培养体系中培养胆囊源干细胞,从而获得功能性肝实质细胞。本发明获得的功能性肝实质细胞具有较高的分化效率,具有治疗肝脏相关疾病的作用。
本发明授权诱导胆囊源干细胞分化为功能性肝实质细胞的方法与应用在权利要求书中公布了:1.一种诱导胆囊源干细胞分化为功能性肝实质细胞的方法,其特征在于:包括以下步骤:S1:将胆囊组织预处理后加入消解液中孕育,过滤,离心收集细胞沉淀;在第一培养体系中培养细胞沉淀,得到胆囊源干细胞;S2:将胆囊源干细胞扩增,消化,定向分化,得到分化细胞;在第二培养体系中培养分化细胞,得到肝细胞前体细胞;S3:在第三培养体系中培养肝细胞前体细胞,得到功能性肝实质细胞;步骤S1中,所述第一培养体系为第一培养基;第一培养基包括如下组分:液体基础培养基、B27添加剂、N2添加剂、青链霉素、0.1-50mMN-乙酰半胱氨酸、0.1-100ngmLR-spondin、1-1000mM尼克酰胺、0.1-100ngmL重组人表皮生长因子、0.1-100ngmL重组人成纤维生长因子、0.1-100ngmL重组人肝细胞生长因子、0.1-100μMALK5抑制剂、0.1-100ngmL重组人Noggin蛋白、0.1-100μMPKC抑制剂、0.1-100μMATPase抑制剂、0.1-100μMRock抑制剂;其中,液体基础培养基:B27添加剂:N2添加剂:青链霉素的体积比为1:1:1:1;步骤S2中,所述第二培养体系为第二培养基;第二培养基包括如下组分:液体基础培养基、B27添加剂、N2添加剂、青链霉素、0.1-50mMN-乙酰半胱氨酸、0.1-100ngmLR-spondin、1-1000mM尼克酰胺、0.1-100ngmL重组人肝细胞生长因子、0.1-100μMTGFβ抑制剂、0.1-100μMγ-Secretase抑制剂、0.1-100μMEGFR抑制剂、0.1-100μMRock抑制剂;其中,液体基础培养基:B27添加剂:N2添加剂:青链霉素的体积比为1:1:1:1;步骤S3中,所述第三培养体系为第三培养基;第三培养基包括如下组分:液体基础培养基、B27添加剂、N2添加剂、青链霉素、0.1-50mMN-乙酰半胱氨酸、0.1-100ngmLR-spondin、1-1000mM尼克酰胺、0.1-100ngmL重组人肝细胞生长因子、0.1-100ngmL重组抑瘤素M、0.1-100μMγ-Secretase抑制剂、0.1-100μMALK5抑制剂、0.1-100μM地塞米松;其中,液体基础培养基:B27添加剂:N2添加剂:青链霉素的体积比为1:1:1:1;步骤S1中,在第一培养体系下,培养时间为2-14d;步骤S2中,在第二种培养体系下,在培养体系中培养时间为10-30d;步骤S3中,在第三种培养体系下,在培养体系中培养时间为1-10d。
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