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摘要：本发明涉及生物纳米颗粒外泌体技术领域，且公开了一种用于改善骨关节炎的生物纳米颗粒衍生外泌体及其应用。细胞培养步骤：8周龄小鼠的软骨中分离软骨细胞，并在含10%胎牛血清的DMEMF12培养基中培养，然后在含有2mgmLII型胶原酶的DMEMF12培养基中消化，消化后的细胞进行离心处理后再进行培养；外泌体分离步骤：从第3‑6代的经上述处理的小鼠滑膜成纤维细胞中分离出外泌体，先从细胞培养物上清液中离心，之后将上清液离心，用PBS洗涤颗粒以去除污染物，再次离心，PBS重悬。本发明通过特定的细胞培养和外泌体分离方法，制备出具有高质量和高活性的用于改善骨关节炎的生物纳米颗粒衍生外泌体。
主权项：1.一种用于改善骨关节炎的生物纳米颗粒衍生外泌体的制备方法，其特征在于：制备方法如下：细胞培养步骤：培养小鼠滑膜成纤维细胞，将其来源限定为Hycyte，使用100nM的SOD3模拟物对照物质进行处理；从8周龄小鼠的软骨中分离软骨细胞，并在含10%胎牛血清的DMEMF12培养基中培养，其中软骨细胞的分离过程为先使用无菌刀片将软骨切成1mm3碎片，然后在含有2mgmLII型胶原酶Thermo的DMEMF12培养基中消化6h，消化后的细胞进行离心处理后再进行培养；外泌体EXOs分离步骤：从第3-6代的经上述处理的小鼠滑膜成纤维细胞中分离出外泌体，先从2×107细胞培养物上清液中依次进行300g离心10min去除细胞、3000g离心15min丢弃细胞碎片，之后将上清液以12万g离心1h，用PBS洗涤颗粒以去除污染物，最后在12万g下再次离心70min，纯化后的颗粒在200µL的PBS中重悬，并在-80℃下保存。
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百度查询： 连云港市第二人民医院(连云港市临床肿瘤研究所) 一种用于改善骨关节炎的生物纳米颗粒衍生外泌体及其应用
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