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摘要:本发明公开了一种壳聚糖改性凹凸棒土的核酸提取材料的制备及应用,属于生物技术领域。该方法具体步骤如下:S1、酸活化改性:将凹凸棒土粉末与HCl水溶液搅拌反应,过滤,洗涤固体,干燥,之后研磨过筛,获得酸活化凹凸棒土。S2、壳聚糖改性:将壳聚糖和酸活化凹凸棒土加入到盐酸中,搅拌,调节pH至中性,干燥溶液,研磨干燥得到的固体,过筛,获得壳聚糖改性凹凸棒土。本发明利用壳聚糖改性凹凸棒土,优化其物理化学性质,使其核酸吸附性能得到极大提升,同时确保成本低廉。
主权项:1.一种核酸提取方法,其特征在于,先取壳聚糖改性凹凸棒土,配制浓度为30mgmL的凹土悬浮液,将凹土悬浮液、含有DNA的溶液、缓冲溶液混合,震荡10min,离心,取离心后的沉淀;缓冲溶液为CH3COOH-CH3COONa溶液;加入缓冲溶液后体系中pH为5,Na+浓度为80mM;再用乙醇洗涤离心后的沉淀,干燥沉淀,用洗脱液和干燥的沉淀混合进行离心,取上清液;洗脱液是浓度为25mM的三聚磷酸钠水溶液;干燥的沉淀和洗脱液的质量体积比为300μg:80~200μL;所述壳聚糖改性凹凸棒土由以下操作步骤制得:S1、酸活化改性:将凹凸棒土粉末与HCl水溶液搅拌反应,过滤,洗涤固体,干燥,之后研磨过筛,获得酸活化凹凸棒土;所述HCl水溶液浓度为5~15wt%;凹凸棒土粉末和HCl水溶液的质量体积比为1g:5~15mL;S2、壳聚糖改性:将壳聚糖和酸活化凹凸棒土加入到盐酸中,搅拌,调节pH至中性,干燥溶液,研磨干燥得到的固体,过筛,获得壳聚糖改性凹凸棒土;酸活化凹凸棒土和壳聚糖的质量比为10:0.5~1.5;步骤S2中盐酸浓度为0.5~1.5wt%。
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百度查询: 江南大学 宁波大学 一种壳聚糖改性凹凸棒土的核酸提取材料的制备及应用
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