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摘要：本发明涉及一种糖蛋白中二硫键的鉴定方法。本发明方法包括TCEP部分还原后嗜热菌蛋白酶切法，所述TCEP部分还原后嗜热菌蛋白酶切法包括以下步骤：S1取待测糖蛋白样品，进行变性处理；S2用三2‑羰基乙基磷盐酸盐溶液还原后，加入N‑乙基马来酰亚胺反应，脱盐；S3加入去糖基化酶，脱盐后测定蛋白浓度；S4加入嗜热菌蛋白酶；S5进行UPLC‑MS分析。本发明方法提供了一种准确、简单、高效地鉴定蛋白质二硫键位点的方法。
主权项：1.一种糖蛋白中二硫键的鉴定方法，其特征在于，其包括TCEP部分还原后嗜热菌蛋白酶切法，所述TCEP部分还原后嗜热菌蛋白酶切法包括以下步骤：（S1）取待测糖蛋白样品，进行变性处理；所述糖蛋白为人绒促性腺素；（S2）用三2-羰基乙基磷盐酸盐溶液还原后，加入N-乙基马来酰亚胺溶液反应，脱盐；（S3）加入去糖基化酶，脱盐后测定蛋白浓度；（S4）加入嗜热菌蛋白酶；（S5）进行UPLC-MS分析；步骤（S1）所述变性处理所用试剂为盐酸胍溶液，所述盐酸胍溶液的浓度为1-10molL，所述盐酸胍溶液的pH为（3±0.5）。
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百度查询： 珠海市丽珠单抗生物技术有限公司 糖蛋白二硫键的鉴定方法
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