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一种检测甲型、乙型流感病毒的胶体金试纸条及制备方法 

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摘要:本发明涉及一种检测甲型、乙型流感病毒的胶体金试纸条及制备方法,属于免疫检测技术领域。本发明从加样端开始,在底板上依次形成有样品垫、结合垫、包被膜和吸水垫,包被膜上设置有甲型流感病毒检测线、乙型流感病毒检测线和质控线,制备得到了一种具有高灵敏度、高特异性和低检测限的用于检测甲型、乙型流感病毒的胶体金试纸条。将本发明提供的胶体金试纸条应用于检测甲型、乙型流感病毒抗原,检测限低至0.25ngmL和0.5ngmL,具有广阔的应用前景。

主权项:1.一种检测甲型、乙型流感病毒的胶体金试纸条的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤S1、配置胶体金溶液及胶体金标记物复溶液,所述胶体金标记物复溶液包含缓冲液、酪蛋白、蔗糖、海藻糖和防腐剂;步骤S2、取胶体金溶液,加入甲型流感病毒捕获抗体和牛血清蛋白,使甲型流感病毒捕获抗体终浓度为15-30μgmL,牛血清蛋白终浓度为0.6-1.5wt%,离心取沉淀物,沉淀物中加入胶体金标记物复溶液,得到胶体金标记的甲型流感病毒捕获抗体复溶液;取胶体金溶液,加入乙型流感病毒捕获抗体和牛血清蛋白,使乙型流感病毒捕获抗体终浓度为15-30μgmL,牛血清蛋白终浓度为0.2-1wt%,离心取沉淀物,沉淀物中加入胶体金标记物复溶液,得到胶体金标记的乙型流感病毒捕获抗体复溶液;取胶体金溶液,加入质控捕获抗体和牛血清蛋白,使质控捕获抗体终浓度为6-15μgmL,牛血清蛋白终浓度为0.2-1wt%,离心取沉淀物,沉淀物中加入胶体金标记物复溶液,得到胶体金标记的质控捕获抗体复溶液;将所述甲型流感病毒捕获抗体复溶液、乙型流感病毒捕获抗体复溶液和质控捕获抗体复溶液均匀混合,喷涂在结合垫上;步骤S3、在包被膜上设置乙型流感病毒检测线、甲型流感病毒检测线和质控线,分别喷涂含有乙型流感病毒检测抗体、甲型流感病毒检测抗体和质控检测抗体的溶液,所述乙型流感病毒检测线、甲型流感病毒检测线和质控线垂直于胶体金试纸条方向排列;所述甲型流感病毒检测抗体终浓度为0.3-1mgmL,所述乙型流感病毒检测抗体终浓度为0.5-1.8mgmL,所述质控检测抗体终浓度为0.5-1.5mgmL;步骤S4、组装样品垫、结合垫、包被膜和吸水垫,得到所述胶体金试纸条。

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