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申请/专利权人：重庆医科大学
摘要：本发明涉及一种高保真等温核酸扩增检测方法及试剂盒，其包括：1通过在引物上修饰光敏分子以及3'末端阻断分子沉默聚合酶引导的引物延伸反应；由特定波长的光源光解光敏分子，再经过酶产生3'‑OH基团，恢复引物延伸功能，从而启动等温核酸扩增。通过光解和去磷酸化双重激活策略，完全消除反应组分在预混过程中导致的预扩增，提高检测灵敏度。2建立高保真等温核酸扩增检测方法，发展一种灵敏度高、通用性强、操作简单的单管核酸检测方法。本发明所述方案能够实时荧光检测，且整体反应可在同一反应容器内中封闭完成，避免了开盖试剂转移过程，简化实验操作，降低了样品间交叉污染的风险。
主权项：1.一种高保真等温核酸扩增检测方法及试剂盒，其特征在于，包括1提供一种高保真等温核酸扩增及检测体系，配制成预混液，加入目标核酸配制成单管混合体系。2将单管混合体系置于特定波长的光源下照射一定时间，然后放入一定温度下的荧光仪中进行等温扩增，同时实时记录荧光信号。所述高保真等温核酸扩增及检测体系包括光笼引物、常规引物、荧光报告探针、等温扩增原料、反应缓冲液、等温扩增酶和目标核酸。所述光笼引物及常规引物是根据靶标核酸序列设计的，其长度为5～100nt。所述光笼引物是至少具有光敏分子以及3'末端阻断分子两种修饰的核苷酸序列，其使得引物暂时失去延伸功能。所述光敏分子具有光照断键特性，其在经特定波长的光源激发后断键，以使所述光敏分子与引物分离，留下缺口3'-末端的磷酸基团；3'-末端的磷酸基团能够被酶去除产生3'-OH基团，恢复引物延伸功能，从而启动等温核酸扩增。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 重庆医科大学 一种高保真等温核酸扩增检测方法及试剂盒
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